2つの強力な阻害剤の複合体に対するマクロファージ移動阻害因子と結晶構造への結合のための光極化試験
José A Cisneros1, Michael J Robertson1, Margarita Valhondo1
1Department of Chemistry, Yale University , New Haven, Connecticut 06520-8107, United States.
Journal of the American Chemical Society
|June 15, 2016
まとめ
研究者は,ヒトマクロファージ移動阻害因子 (MIF) 阻害物質を特定するための新しい光測定法を開発した. この方法は直接の阻害剤結合を正確に測定し,炎症性疾患やがんに対する効果的な薬剤発見を可能にします.
科学分野:
- 生物化学
- 薬剤化学
- 構造生物学
背景:
- ヒトのマクロファージ移動阻害因子 (MIF) はケトエノールタウトメラーゼとサイトカインの活性を持っています.
- MIFは炎症性疾患と癌に関与しています
- L-ドパクロムメチルエステルまたは4-ヒドロキシフェニルピルビック酸を使用したMIF阻害剤の既存の測定は,基板の不安定性とスペクトル干渉に苦しんでいます.
研究 の 目的:
- MIF阻害剤を特定するための堅牢で正確な測定法を開発する.
- 新しいMIF阻害剤の結合を特徴づける.
- 強力なMIF阻害剤の相互作用の構造的基礎を解明する.
主な方法:
- 光ラベル付きMIF阻害剤の合成
- 直接結合測定のための光極化ベースの測定法の開発.
- タンパク質-リガンド複合体の構造を決定するX線結晶学.
主要な成果:
- 新しい光極化測定法により,MIFへの直接的阻害剤結合が正確に測定されます.
- 試験は,競争性,非競争性,共性阻害剤を成功裏に特定した.
- 最も強力な阻害剤は50nMのKd値を示した.
- X線構造は,重要な水素結合,アリル-アリル,およびカチオン-π相互作用が,高親和結合を誘導することを明らかにした.
結論:
- 開発された光偏光検査は,MIF阻害剤の高通量スクリーニングに適しています.
- 新しい強力なMIF阻害剤の設計は,構造的な洞察によって導かれました.
- この研究は,MIFを標的とした新しい治療法の開発のための基盤を提供します.
