化学的 タンパク質 合成 の 溶解 度 の 難題 を 克服 する 手助け
Michael T Jacobsen1, Mark E Petersen1, Xiang Ye2
1Department of Biochemistry, University of Utah School of Medicine , 15 North Medical Drive East, Room 4100, Salt Lake City, Utah 84112-5650, United States.
Journal of the American Chemical Society
|August 18, 2016
まとめ
新しいリンカーであるFmoc-Ddae-OHは,タンパク質合成のために難しいペプチドを溶解するのに役立ちます. この"助け手"のアプローチは,本来の化学結合を用いて,大きく複雑なタンパク質の準備を簡素化します.
科学分野:
- 化学生物学
- 合成化学
- タンパク質化学
背景:
- ネイティブ・ケミカル・リガーション (NCL) はペプチド合成を可能にしますが,不溶性ペプチドと戦います.
- 集積傾向のあるペプチドおよび中間物質は,通常の大きなタンパク質の調製を阻害する.
- 現在の方法は,難しいペプチド配列を処理するための効率的な戦略を欠いている.
研究 の 目的:
- 合成タンパク質の生産を向上させるため,新しいヘテロバイ機能的結合剤であるFmoc-Ddae-OHを導入する.
- ペプチド合成における溶解性と浄化の課題を克服するための一般的なツールを開発する.
- 集積しやすい標的を含む,大きくて複雑なタンパク質の化学合成を容易にする.
主な方法:
- リンカーFmoc-Ddae-OHをライス残基にオンレジンの組み込み
- Fmoc-SPPSの延長により,溶解する"助け手"ペプチド配列が付加される.
- 溶液内でのDdae結合器の割れ方は,NCLの組み立て後に軽い水性ヒドラジンを使用する.
主要な成果:
- モデルシステム (エボラウイルスC20ペプチド,リボソームタンパク質L31) で成功していることが実証されています.
- 97-残留コチャペロニンGroESの難解な合成を可能にし,C端の不溶性を克服しました.
- 合成l-GroESの純度,構造,サポーター活性が検証され,d-GroES合成が可能になった.
結論:
- Fmoc-Ddae-OHは,複雑なペプチドとタンパク質を合成するための頑丈で汎用的なツールです.
- "助け手"戦略は,NCLベースのタンパク質合成の効率を大幅に改善します.
- このアプローチは,複雑なペプチドおよびタンパク質合成における溶解性の問題を克服するために広く適用できます.
