フリズドタンパク質は,C. difficile毒素Bの結腸内皮質受容体である

科学分野:

• 微生物学
• 細胞生物学
• 分子生物学

背景:

• クロストリジウム・ディフィシル毒素B (TcdB) は,C.ディフィシル感染症の重要な要因である.
• TcdB受容体を特定することは,その病原性を理解するために極めて重要です.

研究 の 目的:

• クロストリジウム・ディフィシル毒素B (TcdB) の宿主細胞受容体を特定する.
• TcdBが宿主細胞に入り,細胞機能を破壊するメカニズムを解明する.

主な方法:

• CRISPR- Cas9による全ゲノムスクリーンはTcdB受容体を特定するために使用されました.
• 特定された受容体に対するTcdBの親和性を決定するために,結合測定を行った.
• トリプルノックアウト細胞とオルガノイドモデルを含む細胞耐性アッセイが使用された.
• ノックアウトマウスでのin vivo試験では,TcdBによるダメージに対する感受性を評価した.

主要な成果:

• Wnt受容体Frizzledファミリー (FZDs) のメンバーは,TcdBの重要な受容体として特定されました.
• TcdBは,FZDsのシステイン豊富な領域 (CRD) に結合し,FZD1,FZD2およびFZD7に対する最も高い親和性を有する.
• FZDへのTcdB結合はWnt信号伝達と競合し,Wnt経路を阻害する.
• FZD1/ 2/7のトリプルノックアウト細胞とFZD7のノックアウトマウスモデルは,TcdBに対する有意な耐性を示した.
• 再結合FZD2-CRDはTcdBの結腸上皮への結合を阻害した.

結論:

• フリズドタンパク質 (Frizzled proteins,FZD) は,腸内皮質におけるクロストリジウム・ディフィシル毒素B (TcdB) の生理学的に重要な受容体である.
• TcdBはFZDを使って 細胞の損傷を誘発し 治療のターゲットにします