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Ribosome Profiling02:24

Ribosome Profiling

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Ribosome profiling or ribo-sequencing is a deep sequencing technique that produces a snapshot of active translation in a cell. It selectively sequences the mRNAs protected by ribosomes to get an insight into a cell’s translation landscape at any given point in time.
Applications of ribosome profiling
Ribosome profiling has many applications, including in vivo monitoring of translation inside a particular organ or tissue type and quantifying new protein synthesis levels.
The technique...
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Neville E Sanjana1, Jason Wright2, Kaijie Zheng2

  • 1Broad Institute of MIT and Harvard, 7 Cambridge Center, Cambridge, MA 02142, USA. McGovern Institute for Brain Research, Department of Brain and Cognitive Sciences, Department of Biological Engineering, Massachusetts Institute of Technology, Cambridge, MA 02139, USA. nsanjana@nygenome.org zhang@broadinstitute.org.

Science (New York, N.Y.)
|October 7, 2016
PubMed
まとめ
この要約は機械生成です。

研究者らは,メラノーマの薬剤耐性を 影響する非コーディング要素を特定するために CRISPRスクリーンを開発しました. これらの機能的ノンコーディング領域は遺伝子調節に影響を与え,新しい治療法で標的となる可能性があります.

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科学分野:

  • ゲノミクス
  • 分子生物学
  • 癌 研究

背景:

  • ノンコーディングゲノムは遺伝子調節と病気の病原性において重要な役割を果たします.
  • 非コード要素を特定し操作するための現在のツールは限られており,研究を妨げています.
  • メラノマのBRAF阻害剤耐性は重要な臨床的課題である.

研究 の 目的:

  • 非コーディングゲノム要素の迅速な識別と機能的特徴付けのためのCRISPRスクリーニング方法を開発し,適用する.
  • メラノーマにおけるBRAF阻害剤耐性におけるノンコーディング領域の役割を調査する.
  • 治療戦略の非コーディング要素をターゲットにする可能性を探る.

主な方法:

  • NF1,NF2,CUL3遺伝子を囲む700基以上の単一ガイドRNAを集約したCRISPRスクリーンを利用した.
  • 薬剤耐性を調節する上で機能的に重要な特徴を分析した非コード領域.
  • 転写因子結合と表遺伝的変異への影響を評価するために,特定のCUL3ロカス領域でエンジニアリングされた変異を行った.

主要な成果:

  • メラノーマにおけるBRAF阻害剤耐性を有意に調節する非コーディング部位を特定した.
  • これらの機能的な非コーディング領域は 規制活動の予測特性を有することを発見した.
  • CUL3ロクスの非コーディング領域におけるエンジニアリングによる突然変異は,転写因子占有率と表遺伝的風景を変化させ,遺伝子調節と薬剤耐性を影響することを実証した.

結論:

  • 機能的な非コーディング要素の効率的な発見のための新しいCRISPRスクリーニングツールを開発しました.
  • 特定の非コーディング領域,遺伝子調節,メラノーマの化学療法耐性との関係を確立した.
  • がんにおける薬剤耐性を克服するための潜在的な治療標的として,暗示された非コーディング要素.