生体細胞内の細胞内タンパク質の光イメージングのためのサイト固有のバイオオートホーゴンラベル

科学分野:

• 細胞生物学
• 生物化学
• 化学生物学

背景:

• 光タンパク質は,生きている細胞のタンパク質を視覚化するために一般的ですが,大きくなり,タンパク質の機能を妨げる可能性があります.
• バイオオルトホーガン化学による小さな有機フッ素素による場所固有のラベル付けは,より不快な代替手段を提供します.
• 細胞内タンパク質にラベルを貼ることは 課題です

研究 の 目的:

• 不自然なアミノ酸 (UAA) のサイト固有の組み込みを細胞内タンパク質のバイオオートホーゴンラベルに評価する.
• 哺乳類の細胞内の細胞内タンパク質の光成像のための効率的な方法を開発する.

主な方法:

• 逆電子需要のダイエルス-アルダーサイクル加法のための二酸化素純生物対角 UAA (アルキン/アルケーン) の体系的評価.
• 生きた哺乳類の細胞にラベルを付けるために,テトラジン機能化されたフッ素素を用いる.
• UAAの組み込みとバイオオートゴーナルラベル条件の最適化

主要な成果:

• トランス-サイクロクト-2-エネ-リジンの軸性ダイアステロエーマーを局所的に組み込むことで,効率的かつ特定のバイオオルトゴンラベリングが可能になった.
• 膜関連タンパク質IFITM3の細胞内局所化とリアルタイム輸送を成功裏に画像化しました.
• 他の細胞内タンパク質の効率的なサイト固有の光ラベルが示されています.

結論:

• 生きた哺乳類の細胞内の細胞内タンパク質のバイオオルトゴンラベルと光成像のための堅固な方法を開発した.
• このアプローチは,タンパク質の動力学と局所化を最小限の干渉で研究するための強力なツールを提供します.
• 挑戦的な細胞内標的の 生細胞イメージングの新たな可能性を可能にします