ライシン標的スルフォニルフッ化物プローブによる生細胞における広範囲キナーゼプロファイリング

科学分野:

• 生物化学
• 化学生物学
• 薬理学について

背景:

• タンパク質キナーゼは重要な薬物の標的ですが 選択的抑制は困難です
• 活体細胞における複数のキナーゼとの薬物相互作用を定量化することは困難である.

研究 の 目的:

• 広範囲のキノムラベル付けのためのスルフォニルフッ化物探査機の設計と検証.
• これらの探査機を使って薬による細胞内キナーゼの関与を定量化します.

主な方法:

• キナーゼATP結合部位に保存されたリジン残基を標的としたスルフォニルフッ化物探査機の設計.
• タンパク質結晶学と質量スペクトロメトリで探査機の反応性を確認する.
• 最適化プローブ (XO44) とラベルなしの質量スペクトロメトリーの適用でダサチニブの関与を研究する.

主要な成果:

• サルフォニルフッ化物探査機は,幅広い内生キナーゼを共性的に標識する.
• 細胞内ATPと競合する,最大133のキナーゼを改変した.
• 適切な濃度で特定のキナーゼ標的へのダサチニブ結合の正確な定量化

結論:

• リジン標的スルフォニルフッ化物プローバは,キモプロテオミクスの適用に有効なツールである.
• このアプローチにより,生細胞における薬物標的の関与を正確に測定できます.
• キナーゼ阻害剤の選択性と有効性の理解を容易にする.