生きている細菌コロニーの生物触媒のリアルタイムスクリーニング
Cunyu Yan1, Fabio Parmeggiani1, Emrys A Jones2
1Manchester Synthetic Biology Research Centre for Fine and Speciality Chemicals (SYNBIOCHEM), Manchester Institute of Biotechnology, School of Chemistry, The University of Manchester , 131 Princess Street, M1 7DN, Manchester, United Kingdom.
Journal of the American Chemical Society
|January 14, 2017
まとめ
この研究は,生細菌コロニーの生物触媒的活動を検出するための新しいラベルフリースクリーニングプラットフォームを導入します. この方法は,効率的な酵素発見のために,イオン移動質量スペクトロメトリーイメージング (DiBT-IMMS) と組み合わせた脱吸収電気スプレーイオン化を使用します.
科学分野:
- バイオテクノロジー
- 生物触媒
- 分析化学
背景:
- 生物触媒活動における伝統的なスクリーニング方法は,色測定またはタグベースの検出に依存し,スループットと範囲を制限します.
- 細菌コロニーの新しい酵素を特定することは,バイオテクノロジーと合成生物学を前進させる上で極めて重要です.
研究 の 目的:
- 生きたバクテリアコロニーの生物変換活動を特定するためのラベルフリースクリーニングプラットフォームを開発し,実証する.
- 複数の酵素変種と基板ライブラリの同時スクリーニングを可能にします.
主な方法:
- イオン移動質量スペクトロメトリー画像 (DiBT-IMMS) と組み合わせた脱吸収電圧イオン化を使用した.
- 活体細菌コロニーのアンモニアライアゼとP450モノオキシゲナーゼをスクリーニングするためにプラットフォームを適用しました.
主要な成果:
- 生きた細菌コロニーの生体変異を検知する無標識スクリーニング方法が成功しました.
- DiBT-IMMSを使用して同時に酵素変種と基板ライブラリを複数スクリーニングすることが可能になりました.
結論:
- DiBT-IMMSは,生細菌コロニーの生物触媒活動の高通量スクリーニングのための強力な,ラベルフリーなアプローチを提供します.
- このプラットフォームは 伝統的なスクリーニング技術の限界を克服することで 酵素の発見と工学を前進させます
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