安定的に統合されたクロラムフェニコルアセチルトランスファーゼ遺伝子の厳格な規制は,サル細胞におけるE. coliの乳酸抑制剤によって行われます
J Figge1, C Wright, C J Collins
1Division of Neoplastic Disease Mechanisms, Dana-Farber Cancer Institute, Boston, Massachusetts 02115.
Cell
|March 11, 1988
まとめ
研究者は,誘導可能な遺伝子発現を持つ猿の細胞を作り出した. これらの細胞は,イソプロピルβ-D-チオガラクトシド (IPTG) に曝露すると,レポーター遺伝子を活性化させ,霊長類の細胞における正確な遺伝子制御を示した.
科学分野:
- 分子生物学は分子生物学である.
- 遺伝学 遺伝学とは
- 細胞生物学 細胞生物学
背景:
- リポーター遺伝子の安定した統合が霊長類の染色体に組み込まれることは,遺伝子発現の研究において極めて重要です.
- ラック・レプレッサー・オペレータシステムは,誘導可能な遺伝子調節のための潜在的なメカニズムを提供します.
研究 の 目的:
- 誘導可能な遺伝子発現を研究するために,猿の細胞系を生成する.
- ラック・レプレッサー・オペレータシステムを霊長類の細胞における転写制御に使用する可能性を調査する.
主な方法:
- 集積されたラック・リプレッサーとクロラムフェニコルアセチルトランスファーゼ (CAT) 遺伝子を搭載したサル細胞系を生成する.
- 細胞をイソプロピルβ-D-チオガラクトシド (IPTG) に曝露させ,CAT遺伝子発現を誘発する.
- 異なるIPTG濃度および離脱条件下でのCAT活動の監視.
主要な成果:
- 細胞は,IPTGの曝露時にCAT+フェノタイプを示し,成功した遺伝子誘導を示した.
- CATの活動は60倍まで増加し,有意な転写制御を示した.
- 誘導された細胞は,IPTGの除去後にCAT-フェノタイプに戻り,可逆性を示した.
結論:
- ラック・レプレッサー・オペレーター・コンプレックスは,霊長類の染色体に効果的に結合することができる.
- このシステムは,猿の細胞で厳格な転写抑制と堅固な誘導を提供します.
- 開発された細胞系は,哺乳類のシステムにおける誘導性遺伝子発現の研究のための貴重なツールです.
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