配列型超分子タンデムアッセイによるヒストンメチル化酵素活性部位選択的検出
Yang Liu1, Lizeth Perez1, Adam D Gill1
1Department of Chemistry, ‡Environmental Toxicology Program, §Department of Biochemistry and Molecular Biology, University of California-Riverside , Riverside, California 92521, United States.
Journal of the American Chemical Society
|August 5, 2017
まとめ
この研究は,タンパク質の改変を監視するための新しいセンサーシステムを導入します. 配列された深層カビタンドは,サイト特有の酵素活性検出を可能にし,表遺伝子研究を進めています.
科学分野:
- 生物化学
- 分子生物学
- 化学生物学
背景:
- 翻訳後の修正 (PTM) は,タンパク質の機能を調節するために不可欠です.
- リシンメチルトランスファーゼ (例えば,PRDM9) とデメチラーゼ (例えば,JMJD2E) は表遺伝子調節において重要な役割を果たす.
- PTMの正確なモニタリングは,細胞のプロセスと病気を理解するために不可欠です.
研究 の 目的:
- PTMのサイト・セレクティブ・イン・シット・モニタリングシステムを開発する.
- リシンメチルトランスフェラーゼPRDM9とリシン脱メチラーゼJMJD2Eの活性を調べる
- 非基板ペプチドによる酵素の交叉反応性と干渉の研究を可能にする.
主な方法:
- 配列された深層カビタンドを光ベースの超分子タンデムアッセイに結合する.
- センサーシステムを活用して 酵素の変化をリアルタイムで監視する
- 特定の酵素基板を検出するために3つのカビタンド成分を持つシステムを使用します.
主要な成果:
- PTMのサイト・セレクティブ・イン・シット・モニタリングを達成
- 複合ペプチド混合物でPRDM9とJMJD2Eの特定の基質を成功裏に検出した.
- 交叉反応とペプチド干渉を調査する能力を示した.
結論:
- 開発されたセンサーシステムは,PTMを研究するための強力なツールを提供します.
- この方法により,酵素の特異性と活性を正確に分析できます.
- PRDM9とJMJD2Eによる表遺伝子調節のより深い理解を容易にする.
