クラトリンでコーティングされた穴を浄化されたプラズマ膜に組み立てます

科学分野:

• 細胞生物学 細胞生物学
• エンドサイトーシスの分子メカニズム

背景:

• 受容体媒介性エンドサイトーシスには,コーティングされた穴がコーティングされた小胞を形成します.
• クラトリンおよび関連するタンパク質は,細胞表面のコーティングされた穴を分離し,再構成します.

研究 の 目的:

• コーティングピット機能を制御する分子メカニズムを解明する.
• コーティングピットサイクルの組み立て段階を in vitro で再構成する.

主な方法:

• 浄化された膜 (内生性コーティングピットを除去するために処理された) を細胞細胞質で化します.
• 膜にコーティングされた穴の集合を in vitro で観察する.

主要な成果:

• コーティングされたピット・アセンブリは,イン・ビトロで,無傷の細胞形成を模倣する.
• 膜は,限られた,高親和性クラトリンの結合部位を持っています.
• アセンブリの半減期は,4°Cと37°Cの両方で5分です.
• 180,110,および36 kDaのタンパク質は,組み立て中に採用されます.
• アセンブリはATPに依存しないが,ATPは温度に依存するコーティングピット損失を誘発する.

結論:

• in vitroシステムは,コーティングピット組立を効果的にモデル化しています.
• 特定の分子プレーヤーと条件がコーティングピット形成とダイナミクスを支配する.