生体 細胞 の シルトゥイン を 検出 する 遺伝子 コード の 光 探査 装置
Weimin Xuan1, Anzhi Yao1, Peter G Schultz1
1Department of Chemistry and Skaggs Institute for Chemical Biology, the Scripps Research Institute , 10550 N Torrey Pines Road, La Jolla, California 92037, United States.
Journal of the American Chemical Society
|September 1, 2017
まとめ
研究者たちは 生物の細胞内の シルチューインの活性を検出する 新しい光センサーを開発しました このツールは様々な生物学的プロセスに不可欠なシルトゥイン酵素のモニタリングを可能にします.
科学分野:
- 生物化学
- 分子生物学
- 細胞生物学
背景:
- サーチューインはNAD+に依存するタンパク質脱エチラゼで,様々な生物学的機能を調節する.
- シルトゥインの活性を理解することは,細胞のプロセスや疾患のメカニズムを解読するのに不可欠です.
研究 の 目的:
- 生体細胞におけるシルトゥインの活性をリアルタイムで監視するための 遺伝子コード化された新型光センサーを開発する.
- 様々なヒトシルトゥイン同型に対する探査機の反応と,異なる翻訳後の修正への適用性を検証する.
主な方法:
- EGFPのライシン残留物を利用した遺伝子コード化された光センサー (EGFP-K85AcK) の設計と合成
- ヒトシルトゥインを発現するEscherichia coli ΔcobBおよびHEK293T細胞での探査活動
- SIRT1とSIRT2の活動をモニタリングするために探査機のmCherry融合を使用します.
主要な成果:
- EGFP- K85AcK探査機は,複数のヒトシルトゥイン (SIRT1,SIRT2,SIRT3,SIRT5) にうまく反応した.
- HEK293T細胞でSIRT1とSIRT2の活性を直接モニタリングした.
- このアプローチは他の光タンパク質に拡張され,追加のライシン変異に対してシルトゥイン活性が実証されました.
結論:
- 新しい光探知器は,シルトゥインの活性をインビボで敏感かつ特異的に検出できます.
- このツールはシルトゥインの酵素活性と細胞調節における役割の研究を容易にする.
- この探査プラットフォームは,シルトゥイン関連の様々な研究と薬剤発見の取り組みに適応できます.
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