シトクロームcがペロキシダゼとして: H2O2-誘導コヴァレンント変異による前触媒原産状態の活性化
Victor Yin1, Gary S Shaw1, Lars Konermann1
1Department of Chemistry and Department of Biochemistry, The University of Western Ontario , London, Ontario N6A 5B7, Canada.
サイトクロームc (cyt c) は,H2O2誘導による改変を経て,過酸化剤として機能する. Met80の移位を含むこれらの変化は,アポトーシスにおいて重要な過酸化酵素の活性部位を作り出します.
科学分野:
- 生物化学
- 分子生物学
- 細胞生物学
背景:
- サイトクロームc (cyt c) は呼吸器の電子シャトルとして知られています.
- Cyt cはまた,H2O2による基質酸化を触媒化し,アポトーシスにおいて重要な機能を示す.
- 典型的な過酸化剤とは異なり,ネイティブ・サイトcは6座標で,メット80がヘムの遠隔部位を占め,H2O2の相互作用を阻害しているように見える.
研究 の 目的:
- ネイティブ・サイトクロームcの過酸化作用の構造的基礎を調査する.
- H2O2の存在下で,シトクロームcが過酸化剤として活性化するメカニズムを解明する.
主な方法:
- 質量スペクトロメトリを用いて,H2O2誘発の細胞変化を検出し,特徴づけました.
- 遅延相の観察を含む,サイトカタライズされた過酸化反応の運動分析.
- H2O2によって改変された特定のアミノ酸の残留物の特定
主要な成果:
- cytcによって触媒化された過酸化反応は,前触媒から活性酵素への変換を示唆する初期遅延相を示した.
- 質量スペクトロメトリーにより,H2O2誘発の自己酸化が確認され,過酸化酵素の活性が強化されたプロテオフォームが生成された.
- H2O2誘発による改変は,Tyr67の酸化で始まり,その後にMet80の移転と,その後の炭化化 (おそらくLys72/73) が起こり,遠隔部位が空いている.
結論:
- 本来のcytcの過酸化作用は,H2O2誘発の共性変異に依存する.
- 活性化には,空白の遠隔結合部位を持つTyr67酸化/炭化細胞構造の形成が含まれます.
- これらの改変は,H2O2誘発の共性変化とネイティブの細胞の過酸化作用を結びつける最初の報告である.
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