リンパ球ホーミング受容体cDNAの表現クローニング:ユビキチンは反応性の種である

科学分野:

• 免疫学 免疫学とは
• 分子生物学は分子生物学である.
• 細胞生物学 細胞生物学

背景:

• 辺縁リンパ節にある高エンドセリアル静脈 (HEV) のリンパ球細胞表面受容体は,モノクローナル抗体MEL-14によって認識されます.
• ウビキチンは,タンパク質の分解と調節を含む様々な細胞プロセスに関与するタンパク質です.

研究 の 目的:

• MEL-14.4によって認識されたHEV受容体の分子同一性を調査する.
• HEV受容体発現の調節におけるユビキチンの役割を理解するために.

主な方法:

• MEL-14抗体によるcDNA発現ライブラリのスクリーニング.
• ユビキチンをコードするcDNAクローンの特徴.
• HEV受容体陽性・陰性細胞系におけるユビキチン発現の分析.
• RNAのハイブリッド化とポリユビキチンcDNAの配列分析.

主要な成果:

• MEL-14は,ユビキチンにおける抗原決定因子,特にカルボキシル末端にある13アミノ酸ペプチドを認識しました.
• この決定因子は,無傷で非変性化されたユビキチンまたは他のユビキチン化タンパク質では検出されませんでした.
• MEL-14で識別されたcDNAクローンは,タンデムで繰り返されるユビキチンにコードされており,細胞表面輸出のためのリーダー配列が欠けている.
• ウビキチンmRNAレベルはHEV受容体発現と相関せず,転写後の調節を示唆しています.

結論:

• ユビキチンに関するMEL-14エピトープは,その局所環境と翻訳後の修正に依存しています.
• HEV受容体の調節は,ユビキチン遺伝子転写ではなく,コアポリペプチドの発現またはそのユビキチン化状態によって制御される可能性が高い.