ヒトのNGF受容体の遺伝子転送と分子クローン

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• 神経科学は神経科学である.
• 細胞生物学 細胞生物学

背景:

• 神経成長因子 (NGF) とその受容体は,神経の細胞発達において重要な役割を果たします.
• NGF受容体を理解することは,神経発達過程の研究の鍵です.

研究 の 目的:

• 哺乳類の細胞系でヒトのNGF受容体遺伝子を分子的にクローンし,発現させる.
• 発現したヒトNGF受容体を特徴付け,ネイティブ受容体と比較する.

主な方法:

• ヒトの全DNAの遺伝子移植は,マウスのL細胞へ.
• アフィニティ・クロスリンク,メタボリック・ラベリング,イムノプレシピテーション,バランス・バインディング・アッセイ.
• 人間のAluの繰り返し配列とコスミッドベクトルを用いた分子クローニング.

主要な成果:

• マウスのL細胞変容体におけるヒトNGF受容体の安定的な発現.
• 発現した受容体は,ヒトのメラノーマとネズミのPC12細胞受容体に対して同じサイズと結合特性を示した.
• コスミッドクローニングによるヒトNGF受容体遺伝子の隔離に成功した.

結論:

• 人間のNGF受容体遺伝子は効率的にクローンされ,マウス細胞で発現することができます.
• このシステムは,NGF受容体の機能と神経頂部発達におけるその役割を研究するためのモデルを提供します.