関連する実験動画
Updated: Feb 6, 2026

11:30
Tandem Affinity Purification of Protein Complexes from Eukaryotic Cells
Published on: January 26, 2017
15.6K
リボソームプロファイリングによって明らかにされたエウカリオットのタンパク質複合体のコトランスレーション組成
Ayala Shiber1,2, Kristina Döring3,4, Ulrike Friedrich3,4
1Center for Molecular Biology of Heidelberg University (ZMBH), DKFZ-ZMBH Alliance, Heidelberg, Germany. a.shiber@zmbh.uni-heidelberg.de.
Nature
|August 31, 2018
まとめ
酵母におけるタンパク質複合体の組み立ては,しばしばトランスレーション中に起こり,誤った折り畳みと結合を防ぐ. このコトランスレーションプロセスは タンパク質の合成,折り畳み,組み立てを ユカリオットに統合する.
科学分野:
- 分子生物学
- 細胞生物学
- 生物化学
背景:
- 混雑した細胞環境でタンパク質の折り畳みは困難で 誤った折り畳みと結合の危険性があります
- 細胞はコトランスレーションの折りたたみのために分子チャペロンを利用するが,トランスレーション中のタンパク質複合体の組み立ては,真核生物では十分に理解されていない.
- ユカリオット系は,プロカリオット系 (例えば,希少なポリシストロニックmRNA) と異なっており,コトランスレーションアセンブリの協調性に関する疑問を提起している.
研究 の 目的:
- ユカリオットにおけるヘテロオリゴメリックタンパク質複合体の in vivo アセンブリを体系的に分析する.
- タンパク質複合体の組み立てがSaccharomyces cerevisiaeの翻訳と連携しているかどうかを調査する.
- コトランスレーションアセンブリとその規制のメカニズム的な詳細を解明する.
主な方法:
- イーストの12のヘテロオリゴメリック複合体からの新生サブユニットのインビボ相互作用を決定するためにリボソームプロファイリングを使用した.
- 分析されたサブユニットの相互作用は,残留に近い解像度で.
- Hsp70 Ssbなどのリボソーム関連チャペロンの役割を調査した.
主要な成果:
- 研究された12のヘテロオリゴメリック複合体のうち9つは共翻訳的に組み立てられる.
- コトランスレーションアセンブリを示さない3つの複合体は,専用のアセンブリチャペロンによって制御される.
- コトランスレーションアセンブリはしばしば一方的に発生し,サブユニットは新生パートナーを巻き込み,結合を防ぐ.
- サブユニット関連の発症は,リボソームトンネル出口の相互作用領域の曝露と相関する.
- リボソーム関連Hsp70Ssbは,組み立て前に一時的にドメインと結合し,早期の相互作用を防ぐ.
結論:
- 酵母におけるヘテロオリゴメア組成の主要なメカニズムは,コトランスレーションサブユニット結合である.
- 翻訳,折り畳み,タンパク質複合体の組み立ては,真核生物における統合されたプロセスである.
- この統合はタンパク質の適切な機能と 細胞の恒常性を促進します
関連する概念動画
Protein Complex Assembly
16.8K
Proteins can form homomeric complexes with another unit of the same protein or heteromeric complexes with different types. Most protein complexes self-assemble spontaneously via ordered pathways, while some proteins need assembly factors that guide their proper assembly. Despite the crowded intracellular environment, proteins usually interact with their correct partners and form functional complexes.
Many viruses self-assemble into a fully functional unit using the infected host cell to...
Many viruses self-assemble into a fully functional unit using the infected host cell to...
16.8K
Protein Complex Assembly
2.6K
2.6K
Ribosomal RNA Synthesis
14.9K
Ribosome synthesis is a highly complex and coordinated process involving more than 200 assembly factors. The synthesis and processing of ribosomal components occurs not only in the nucleolus but also in the nucleoplasm and the cytoplasm of eukaryotic cells.
Ribosome biogenesis begins with the synthesis of 5S and 45S pre-rRNAs by distinct RNA polymerases. The primary transcripts are extensively processed and modified before they are bound and folded by ribosomal proteins and assembly factors,...
Ribosome biogenesis begins with the synthesis of 5S and 45S pre-rRNAs by distinct RNA polymerases. The primary transcripts are extensively processed and modified before they are bound and folded by ribosomal proteins and assembly factors,...
14.9K
Ribosome Profiling
4.2K
Ribosome profiling or ribo-sequencing is a deep sequencing technique that produces a snapshot of active translation in a cell. It selectively sequences the mRNAs protected by ribosomes to get an insight into a cell’s translation landscape at any given point in time.
Applications of ribosome profiling
Ribosome profiling has many applications, including in vivo monitoring of translation inside a particular organ or tissue type and quantifying new protein synthesis levels.
The technique...
Applications of ribosome profiling
Ribosome profiling has many applications, including in vivo monitoring of translation inside a particular organ or tissue type and quantifying new protein synthesis levels.
The technique...
4.2K
Ribosomes
76.2K
Ribosomes translate genetic information encoded by messenger RNA (mRNA) into proteins. Both prokaryotic and eukaryotic cells have ribosomes. Cells that synthesize large quantities of protein—such as secretory cells in the human pancreas—can contain millions of ribosomes.
Ribosome Structure and Assembly
Ribosomes are composed of ribosomal RNA (rRNA) and proteins. In eukaryotes, rRNA is transcribed from genes in the nucleolus—a part of the nucleus that specializes in ribosome...
Ribosome Structure and Assembly
Ribosomes are composed of ribosomal RNA (rRNA) and proteins. In eukaryotes, rRNA is transcribed from genes in the nucleolus—a part of the nucleus that specializes in ribosome...
76.2K
Eukaryotic RNA Polymerases
27.1K
RNA Polymerase (RNAP) is conserved in all animals, with bacterial, archaeal, and eukaryotic RNAPs sharing significant sequence, structural, and functional similarities. Among the three eukaryotic RNAPs, RNA Polymerase II is most similar to bacterial RNAP in terms of both structural organization and folding topologies of the enzyme subunits. However, these similarities are not reflected in their mechanism of action.
All three eukaryotic RNAPs require specific transcription factors, of which the...
All three eukaryotic RNAPs require specific transcription factors, of which the...
27.1K

