周期的なAMPとホルボールのエステル誘導性DNA要素である. | JoVE Visualize

科学分野:

分子生物学は分子生物学である.
細胞シグナリング
神経科学は神経科学である.

背景:

細胞のプロセスは,細胞表面受容体と第2伝達物質を通じて作用するホルモンや神経伝達物質によって調節されます.
サイクルアデノシンモノフォスファート (cAMP) は,アデニラートサイクラース活性を調節する重要な第2メッセンジャーです.
フォルボールのエステルは,フォスファティディルノシトール経路に関与するタンパク質キナーゼCを活性化します.

研究の目的:

第2伝達物質によるプロエンケファリン遺伝子発現の調節を調査する.
cAMPとホルボールのエステルによる転写調節を媒介するDNA配列を特定する.

主な方法:

組織培養細胞におけるプロエンケファリン-クロラムフェニコールアセチルトランスファーゼ融合遺伝子の一時的な発現.
cAMP アナログ,アデニラートサイクラース活性化剤,ホルボールのエステルによる治療.
規制DNA配列をマッピングするための削除分析.

主要な成果:

cAMP アナログとアデニル酸サイクラース活性化剤は,融合遺伝子を調節する.
フォルボールのエステルはまた,特にリン酸化エステル酶阻害剤で,融合遺伝子を調節します.
プロエンケファリン遺伝子のmRNAキャップサイトへの37塩基対領域5'は,両方のシグナル伝達経路による調節に不可欠である.
この領域には3つの関連した12-bp配列が含まれており,転写強化剤として機能しています.

結論:

プロエンケファリン遺伝子の発現は,cAMPとタンパク質キナーゼCを含む細胞内信号伝達経路によって調節される.
プロエンケファリン遺伝子プロモーター内の保存された強化要素は,これらのシグナル伝達経路への応答を媒介する.
この発見は,遺伝子発現のトランスシナプス調節のメカニズムを明らかにしています.