牛のカルボキシペプチダゼEのクローニングとcDNAの配列分析

科学分野:

• バイオケミストリー バイオケミストリー
• 分子生物学は分子生物学である.
• 神経科学は神経科学である.

背景:

• カーボキシペプチダゼE (CPE) は,エンケファリンコンバーターゼとも呼ばれ,カーボキシペプチダゼB型酵素である.
• それは,分泌粒子の内のエンケファリンおよび他の神経ペプチドの生物合成に重要な役割を果たします.
• CPEは,分子量にわずかな差異がある溶解性および膜結合性の両方で存在します.

研究 の 目的:

• 異なる組織形態のCPEが単一の遺伝子から発生するかどうかを調査する.
• 神経ペプチド処理におけるCPEの遺伝的基礎と潜在的広範な機能を明らかにする.

主な方法:

• 浄化されたCPEの部分シーケンシング.
• オリゴヌクレオチドプローブを使用して,牛の脳垂体cDNAライブラリから,CPEをコードするクローンの分離.
• bovine pituitary poly ((A) + RNA サイズの分析. 牛の pituitary poly ((A) + RNA サイズの分析. 牛の pituitary poly ((A) + RNA サイズの分析. 牛の pituitary poly ((A) + RNA サイズの分析. 牛の pituitary poly ((A) + RNA サイズの分析.
• 牛のゲノムDNAの制限分析 牛のゲノムDNAの制限分析

主要な成果:

• CPEをコードするcDNAクローンが分離され,部分タンパク質配列が確認され,カルボキシペプチダゼAとBとの同質性が明らかになった.
• cDNAは,多種多様な bovine pituitary RNA (3.3,2.6,および2.1 kb) にハイブリッド化し,3.3-kb mRNAが優勢であった.
• ゲノムDNA分析は,たった1つのCPE遺伝子の存在を示した.

結論:

• CPEの単一の遺伝子の存在は,CPE形態の変異は,翻訳後の改変または代替スプライシングによる可能性が高いことを示唆しています.
• この単一遺伝子の仮説は,様々な組織にわたる多数の神経ペプチドの生物合成において,CPEの広範で根本的な役割を支持しています.