ビタミンDの鳥類受容体をコードする補完的なDNAの分子クローン化

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• 内分泌学 エンドックリノロジー
• 遺伝学 遺伝学とは

背景:

• ビタミンD3受容体は,1,25-ジヒドロキシビタミンD3 [1,25(OH) 2D3]の作用を媒介するために重要な細胞内タンパク質です.
• ビタミンD受容体機能の分子基礎を理解することは,様々な生理学的プロセスにおけるビタミンD受容体の役割を理解するために不可欠です.

研究 の 目的:

• ビタミンD3受容体をコードする補完DNA (cDNA) を分離し,特徴づけること.
• ビタミンD3受容体配列内の保存ドメインを特定し,他の核受容体と比較する.

主な方法:

• 鶏の腸内をスクリーニングするために受容体特異のモノクローナル抗体を利用した lambda gt11 cDNA発現ライブラリ.
• 複製されたcDNAからアミノ酸配列を推論し,メッセージRNA (mRNA) の発現パターンを調べるために北方斑分析を行った.
• cDNA配列とのハイブリッド化は,ビタミンD3受容体の細胞フリー合成を直接するために使用されました.

主要な成果:

• ビタミンD3受容体のcDNAをクローンし,他のステロイド受容体とgag-erbAオンコゲンの同類である保存されたシステイン豊富な領域を明らかにしました.
• 鶏の組織で2つのビタミンD受容体mRNA (2.6および3.2キロベース) と,マウスの線維芽細胞で4.2キロベースmRNAを特定した.
• マウス細胞が1,25(OH) 2D3.3.に曝露すると,4.2キロベースmRNA種が有意に増加することを実証した.

結論:

• クローンされたcDNAは,本物のビタミンに対する最初の受容体配列を表し,さらなる研究のための重要なツールを提供します.
• この発見は,ステロイド受容体ドメインの進化的保存を強調し,ビタミンD受容体遺伝子発現の調節に関する洞察を提供します.