クローンネズミの肝臓のギャップジャンクション補完DNAから機能的な細胞-細胞チャネルの発現

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• 細胞生物学 細胞生物学
• バイオケミストリー バイオケミストリー

背景:

• ギャップ・ジャンクションは,細胞間通信に不可欠です.
• 肝臓のギャップ・ジャンクション (cDNA) でコード化された特定のタンパク質と,チャネル形成におけるその役割は,明らかにする必要があります.

研究 の 目的:

• 肝臓のギャップジャンクションタンパク質をコードする補完DNA (cDNA) クロンが,機能的な細胞-細胞チャネルを形成するのに十分であるかどうかを判断する.
• 卵細胞細胞チャンネル形成における肝臓のギャップ・ジャンクション・プロテインの役割を調査する.

主な方法:

• 細胞細胞のチャンネル形成を研究するためにオオサイト発現システムを利用しました.
• 肝臓にポリアデニル化メッセンジャーRNA (mRNA),アンチセンセスRNA,およびインビトロ転写されたギャップジャンクションmRNAを注入した卵細胞.
• 選択されたmRNAを,トランスレーションのためのギャップジャンクションcDNAクローンへのハイブリッド化を経由して選択します.

主要な成果:

• 肝臓のmRNAを卵子細胞に注入することで,細胞間チャンネルが誘発される.
• アンチセンセスのRNAは,この誘導をブロックし,特異性を示した.
• cDNAクローンによって選択されたmRNAは,選択されていないmRNAと比較して,より高い交差点伝導率をもたらしました.
• 熱ショックプロモーターの下でクローンされたcDNAの発現はまた,細胞細胞チャンネルを形成しました.

結論:

• 肝臓のギャップ・ジャンクション (cDNA) は,機能的な細胞-細胞チャネルの形成に不可欠なタンパク質をコードします.
• 卵細胞発現系は,ギャップジャンクションタンパク質の機能を研究するための実用的なモデルです.