オアバイン耐性とは,ネズミのNa+,K+-ATPaseαサブユニットのcDNAの発現によって与えられる

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• 細胞生物学 細胞生物学
• バイオケミストリー バイオケミストリー

背景:

• 霊長類とネズミの細胞は,心臓のグリコシドオアバインに対する感受性の有意な違いを示しています.
• Na+とK+に依存するアデノシントリフォスファタゼ (Na+/K+-ATPase) は,ほとんどの動物細胞で細胞イオングラデーションを維持するために重要である.

研究 の 目的:

• 灵長類とネズミの細胞間のオアバインの感受性の差異の分子基礎を解明する.
• 遺伝的アプローチを用いてNa+/K+-ATPase alpha 1サブユニットの構造-機能関係を調査する.

主な方法:

• ネズミのNa+/K+-ATPase alpha 1サブユニットをコードする補完DNA (cDNA) をpSV2発現ベクトルにクローンして挿入する.
• 猿のCV-1細胞を,エンジニアリングされたDNA分子で感染させる.
• 感染した細胞におけるオアバイン耐性を測定する.
• クリティカルな機能ドメインを特定するために,アルファ1サブユニットcDNAの削除変異.

主要な成果:

• エンジニアリングされたDNA分子は,猿のCV-1細胞に10(-4) Mオアバインに対する耐性を授与した.
• アルファ1サブユニットのカルボキシル末端をコードする配列の削除により,オアバインに対する耐性活性が廃止されました.
• 全長アルファ1サブユニットのcDNAは,オアバイン感受性細胞における支配的な選択性マーカーとして機能する.

結論:

• Na+/K+-ATPase alpha 1サブユニットの遺伝子操作は,オアバイン耐性を授与し,異なった感受性を説明します.
• 分子遺伝技術は,Na+/K+-ATPaseの構造-機能関係の研究に適用できます.
• マウスのアルファ1サブユニットcDNAによって与えられるオアバイン抵抗性は,体細胞遺伝学の貴重なツールです.