S. cerevisiae熱ショック転写因子をコードする遺伝子の分離

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• イースト遺伝学 イースト遺伝学
• トランスクリプション・ファクター研究

背景:

• 熱ショック転写因子 (HSF) は,細胞のストレス反応の重要な調節因子である.
• HSF1の構造と機能を理解することは,ストレス下での遺伝子調節を解読する鍵です.

研究 の 目的:

• 酵母熱ショック転写因子遺伝子 (HSF1) を分離し,特徴づけること.
• HSF1タンパク質のDNA結合ドメインを特定するために.

主な方法:

• ラムダ gt11.11 を使用したゲノム図書館スクリーニング
• DNAシーケンシングとタンパク質質量決定.
• E. coliと酵母菌における機能的発現.
• 南部の解析と遺伝子破壊実験.

主要な成果:

• HSF1遺伝子は,成功裏に分離され,配列化され,833アミノ酸タンパク質をコードしました.
• 発現したタンパク質は,特定のDNA結合と転写活性を示し,遺伝子の同一性を確認した.
• HSF1は酵母における単一複製の必須遺伝子である.
• DNA結合ドメインは118のアミノ酸領域にマッピングされました.

結論:

• 酵母HSF1遺伝子はクローン化され,特徴づけられました.
• HSF1のDNA結合ドメインは,既知のDNA結合構造モチーフに適合していない.
• HSF1は酵母生存に不可欠な遺伝子である.