不効率な翻訳開始は,lacZ遺伝子の早すぎる転写終結を引き起こします

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• バクテリア学 バクテリア学
• 遺伝学 遺伝学とは

背景:

• トランスクリプションの極性は,細菌の遺伝子発現に影響します.
• リボソーム結合部位は,翻訳開始とmRNAの安定性に影響を与えます.
• ファグのラムダNタンパク質は,転写終結に影響することが知られている.

研究 の 目的:

• E. coliにおけるリボソーム負荷と転写終結の関係を調査する.
• 転写極性を克服するファグラムダNタンパク質の役割を決定する.
• 早期転写終結のメカニズムを解明する.

主な方法:

• ファグ・ラムダPLプロモーターの下でlacZ遺伝子を持つ発現プラズミドの構築.
• 異なったリボソーム結合部位を利用して,翻訳開始を変化させる.
• 正常なE. coli宿主におけるlacZ mRNA合成と,ファグラムダNタンパク質を発現する宿主との比較.

主要な成果:

• 正常な宿主において,lacZ mRNAレベルは,異なるリボソーム結合部位によって,著しく (100倍) 変化した.
• ファグラムダNタンパク質を持つ宿主において,すべてのベクターは,同じ量の全長lacZ mRNAを産生した.
• ベータ-ガラクトシダース発現の差異は,Nタンパク質の存在において均一なmRNA濃度にもかかわらず維持された.

結論:

• リボソームの負荷率は,lacZ遺伝子のトランスクリプションの継続に直接影響を与えます.
• RNAポリメラーゼとリボソームの間の長距離は,早期終結を促進することによって,極性を引き起こす可能性があります.
• 終結の条件的性質は,終結因子Rho.の関与を示唆する.