関連する実験動画
Updated: Jan 28, 2026

Functional Assessment of BRCA1 variants using CRISPR-Mediated Base Editors
Published on: February 28, 2021
サイトシン塩基エディターは,マウス胚で実質的なオフターゲットの単核酸変異を生成する
Erwei Zuo1,2, Yidi Sun3, Wu Wei4,5,6
1Institute of Neuroscience, State Key Laboratory of Neuroscience, Key Laboratory of Primate Neurobiology, CAS Center for Excellence in Brain Science and Intelligence Technology, Shanghai Research Center for Brain Science and Brain-Inspired Intelligence, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China.
ゲノム編集は 遺伝子変異を修正できますが 標的外効果は 追跡するのが難しいのです 新しい方法であるGOTIでは,CRISPR-Cas9とアデニン塩基エディタは,サイトシン塩基エディタとは異なり,標的外変異が少ないことが示されています.
科学分野:
- 遺伝学
- 分子生物学
- バイオエンジニアリング
背景:
- CRISPR-Cas9のような ゲノム編集技術は 病原性の変異を修正することで 遺伝疾患の治療の可能性を提供します
- 対象外変異の正確な評価は,ゲノム編集アプリケーションの安全性と有効性にとって極めて重要です.
- シングルヌクレオチドポリモルフィズム (SNP) のような個々の遺伝的変異は,真のオフターゲット編集イベントの識別を複雑にする.
研究 の 目的:
- ゲノム編集ツールによって誘発されるゲノム全体のオフターゲットの変異を検出するための敏感な方法を開発し,検証する.
- 異なるベースエディターとCRISPR-Cas9の信頼性を比較する.
- 初期マウス胚の非標的変異率の基準を確立する.
主な方法:
- 2 細胞胚注入 (GOTI) 方法による全ゲノムオフターゲット分析の開発.
- CRISPR-Cas9またはアデニン塩基エディター (ABAE) またはサイトシン塩基エディター (CBE) を使用した2細胞段階のマウス胚の1つのブラストオメアの編集.
- 胚の14.5日に編集されたおよび編集されていないブラストメアからの子孫細胞の全ゲノム配列化により,対象外単核酸変異体 (SNVs) を特定する.
主要な成果:
- GOTIはゲノム全体で 標的外変異を成功裏に検出しました
- CRISPR- Cas9とABAEの編集により,稀な非標的SNVが発生し,その頻度は自発的な変異率に匹敵する.
- サイトシンベースエディター (CBE) は,自発的なレートより20倍以上の周波数でSNVを誘導し,低精度を示した.
結論:
- GOTIは,全ゲノムにわたる非標的変異を評価するための効果的な方法である.
- CRISPR-Cas9とABAEは初期胚のインビボゲノム編集に高い特異性を示しています.
- サイトシンベースエディターには,信頼性を向上させ,意図しないオフターゲットの変異を減らすためにさらなる最適化が必要です.
関連する概念動画
Single Nucleotide Polymorphisms-SNPs
Nucleotide Excision Repair
Nucleotide Excision Repair
Cells are regularly exposed to mutagens—factors in the environment that can damage DNA and generate mutations. UV radiation is one of the most common mutagens and is estimated to introduce a significant number of changes in DNA. These include bends or kinks in the structure, which can block DNA replication or transcription. If these errors are not fixed, the damage can cause mutations, which in turn can result in cancer or disease depending on which sequences are...
Histone Variants at the Centromere
DNA Base Pairing
Nucleic Acids and Nucleotides
Deoxyribonucleic Acid (DNA)
DNA is the genetic material in all living organisms, ranging from single-celled bacteria to multicellular mammals. It is in the nucleus of eukaryotes and the organelles such as chloroplasts and mitochondria....

