CRISPR-Cas9の小分子阻害剤を特定するための高通量プラットフォーム
Basudeb Maji1, Soumyashree A Gangopadhyay1, Miseon Lee2
1Chemical Biology and Therapeutics Science Program, Broad Institute of MIT and Harvard, Cambridge, MA 02142, USA; Department of Medicine, Harvard Medical School, Boston, MA 02115, USA; Divisions of Renal Medicine and Engineering, Brigham and Women's Hospital, Boston, MA 02115, USA.
科学者たちはCRISPR-Cas9遺伝子編集を制御する 最初の合成小分子を開発しました これらの細胞浸透性阻害剤は ゲノム工学の技術に対して 精密で可逆的な制御を提供します
科学分野:
- 分子生物学
- 生物化学
- 化学生物学
背景:
- CRISPR-Cas9の正確な制御は ゲノム工学の進歩に不可欠です
- CRISPR-Cas9の活動を制御する既存の方法は限界があります
- 小分子阻害剤の開発は,CRISPR-Cas9を調節するための新しいアプローチを提供します.
研究 の 目的:
- Streptococcus pyogenes Cas9 (SpCas9) の合成小分子阻害剤を特定するための一般化可能なプラットフォームを開発する.
- SpCas9の活性を正確に制御するために,細胞に浸透し,逆転し,安定した阻害剤を作成します.
- SpCas9および関連する核酵素の阻害剤を迅速に特定する方法を確立する.
主な方法:
- プロトスペーサーの隣接モチーフ結合を含むSpCas9機能のための高通量アッセイを開発した.
- 自然製品のような小さな分子のコレクションを 検出した
- SpCas9 阻害のための薬剤を特定するために,構造-活性関係を利用しました.
主要な成果:
- SpCas9 (<500 Da) の最初の合成小分子阻害剤を特定し,細胞に浸透し,逆転し,安定している.
- SpCas9の投与量と時間的な制御と,転写活性化を含む,触媒的に損なわれたSpCas9技術.
- SpCas9阻害のための薬剤を確立しました.
結論:
- SpCas9の合成,ミニチュア,細胞浸透性および可逆性阻害剤の発見のための一般化可能なプラットフォームが確立されています.
- これらの小分子は,CRISPR- Cas9の活性に対する正確な時間的および用量依存の制御を提供します.
- このプラットフォームは,次世代のCRISPR関連ヌクレアースの阻害剤を特定するために拡張できます.
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