局所特有の,安定的に統合されたトランスジェニック要素を持つソマティックマウスモザイクの急速な生成
Gi Bum Kim1, David Rincon Fernandez Pacheco1, David Saxon1
1Board of Governors Regenerative Medicine Institute, Cedars-Sinai Medical Center, Los Angeles, CA 90048, USA.
Cell
|September 21, 2019
まとめ
双重複合酶媒介カセット交換 (MADR) によるモザイク分析は,体細胞の遺伝子改変を正確に制御することを可能にします. この新しい方法は,安定したラベル付けとトランスゲン操作を可能にし,複雑な体内のモザイクマウスモデルの作成を民主化します.
科学分野:
- 遺伝学
- 分子生物学
- 発達生物学
背景:
- 現在,体内の変異性マウスのインサイト変異法 (ウイルス,電解) は,遺伝的パラメータの制御が欠けている.
- 正確なモデリングには,コピー数,ジゴシティ,およびロカス特異性に対する正確な制御が不可欠です.
研究 の 目的:
- 体細胞の精密な遺伝子工学のための新しい方法を確立する.
- 遺伝子特性を有するソマティック・モザイクマウスモデルを生成するための汎用プラットフォームを開発する.
主な方法:
- デュアル・リコンビネーゼ媒介カセット交換 (MADR) によるモザイク分析の開発
- 組み合わせラベリング,誘導性/可逆性トランスゲン操作,VCre再結合酵素発現のための要素を含むツールキットの作成.
- MADRの適用は,混合ジゴシティとパーソナライズされたドライバー変異を持つグリオマモデルを生成する.
主要な成果:
- MADRは,精密に定義された染色体位置に変異細胞をトランスジェニック要素で安定したラベル付けを可能にします.
- ヒトの細胞で成功している
- ミックス・リポーター・識別型ジゴシティーとパーソナライズド・ドライバ・ミューテーションを含む多機能性グリオマモデルを成功裏に作成しました.
結論:
- MADRは体細胞内の遺伝要素を正確に制御し,既存の方法の限界を克服します.
- MADRプラットフォームは,多数の既存のマウスラインに拡張でき,体性モザイクマウスの生成を容易にします.
- この技術は研究のための 洗練された体内のモザイクモデルを 民主化します
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