発がん性突然変異は,タンパク質をフォスフォチロシン部位に切り替えて信号伝達経路を再構築する
Alicia Lundby1, Giulia Franciosa2, Kristina B Emdal2
1Novo Nordisk Foundation Center for Protein Research, University of Copenhagen, Faculty of Health and Medical Sciences, Blegdamsvej 3b, DK-2200 Copenhagen, Denmark; Department of Biomedical Sciences, Faculty of Health and Medical Sciences, University of Copenhagen, Copenhagen, Denmark.
研究者は,組織におけるチロシン酸化シグナリングをマッピングするための質量スペクトロメトリ法を開発した. このアプローチは タンパク質の相互作用を解読し 変異が癌のシグナル伝達ネットワークを再構築する方法を明らかにし 腫瘍発生メカニズムへの洞察を提供します
科学分野:
- 分子生物学
- プロテオミクス
- 癌 の 信号
背景:
- タイロシン酸化は健康と病気における細胞信号伝達に不可欠です.
- 既存の方法では,組織内のフォスフォチロシン部位の高通量機能注釈が欠けている.
- 信号ネットワークを理解することは (病理) 生理学の解読に不可欠です.
研究 の 目的:
- マススペクトロメトリーに基づく相互作用プロテオミクスのアプローチを開発し,組織サンプルに直接フォスフォチロシン部位の機能的アノテーションを行う.
- 肺組織における表皮成長因子 (EGF) に依存するシグナルネットワークを解読する.
- EGFで調節されるフォスフォチロシン部位に,その採用されたタンパク質シグナリング複合体を特定することで,機能を割り当てます.
主な方法:
- 質量スペクトロメトリーに基づく相互作用プロテオミクス戦略を開発し,適用した.
- EGFが刺激した肺組織における 1,000以上のフォスフォチロシン部位を定量化した.
- フォスフォペプチドを1000回以上取り下ろし 急速な質量分析を行った.
主要な成果:
- 肺組織におけるEGF依存のシグナルネットワークのマッピングに成功し,1000以上のフォスフォチロシン部位を特定しました.
- EGFが調節するフォスフォチロシン部位によって誘発されるタンパク質シグナリング複合体を決定した.
- チロシン残留の近くの変異が癌のシグナリングネットワークを再構築し,肺がんEGFR変異体の腫瘍性特性を特定することが示されました.
- スケーラブルなフォスフォペプチド・プルダウンにより,タンパク質の相互作用における組織特異性を明らかにした.
結論:
- 開発されたアプローチは,組織内のリン酸化部位の機能的な注釈のための一般的な戦略を提供します.
- 信号ネットワークの腫瘍性再配線に関する 深いメカニズム的な洞察を可能にします
- 多様な生理学的および病理学的状況におけるチロシンリン酸化の研究を容易にする.
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