構造化されたランダムRNAプールの大型増強
Fabio Chizzolini1, Luiz F M Passalacqua1, Mona Oumais2
1Department of Pharmaceutical Sciences , University of California at Irvine , Irvine , California 92697 , United States.
Journal of the American Chemical Society
|December 31, 2019
まとめ
折りたたまれた,結合しないRNAプールを選択すると,機能的な分子の頻度が大幅に増加します. この方法は,低多様性ライブラリからでも,新しいアプタマーとリボ酵素の発見を促進します.
科学分野:
- 化学生物学
- 合成生物学
- 分子 進化
背景:
- 機能性RNAの実験室での進化は化学および合成生物学にとって極めて重要です.
- 試験管内選択には,アプタマーやリボ酵素のような機能的分子が必要です.
- ランダムシーケンスのRNAプールには,低フェノタイプの可能性と高結合傾向があります.
研究 の 目的:
- モノメアで結合しない配列を選択することで,機能的なRNAを濃縮する方法を開発する.
- 活性分子の効率的な分離のためのRNAプールの現象的可能性を高める.
主な方法:
- ランダムなプールからモノメアRNA配列を6回選択した.
- 濃縮されたコンパクトプールの性能と完全にランダムなプールの in vitro 選択を比較した.
- 2つのプールタイプにおける機能性RNAの頻度を測定することによって,フェノタイプの可能性を評価した.
主要な成果:
- モノメア配列の選択により,コンパクトに折りたたまれたRNA群が生じた.
- 濃縮されたコンパクトプールは,ランダムプールよりもインビトロ選択で一貫して優位であった.
- コンパクトプールはランダムプールより約1000倍高い現象的潜在性を示した.
結論:
- 折りたたまれたRNAと単体RNAのプールを選択すると,機能RNAの頻度が大幅に増加します.
- このアプローチは,低多様性集団から高度に活性な機能性RNAを分離するための簡単な方法を提供します.
- 強化されたプールは,新しいRNA機能を発見するためのより効率的な出発点を提供します.
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