RNA 亜細胞の位置を画像化するための遺伝子カスケード増幅
Kewei Ren1, Rigumula Wu1, Aruni P K K Karunanayake Mudiyanselage1
1Department of Chemistry , University of Massachusetts , Amherst , Massachusetts 01003 , United States.
Journal of the American Chemical Society
|January 23, 2020
まとめ
研究者らは,生きている細胞における in situ RNA イメージングのための新しい遺伝的にコードされた方法を開発しました. この技術は,敏感な検出とRNA標的のサブセルラー局所化のために,分割されたブロッコリーRNAレポーターを使用します.
科学分野:
- 分子生物学
- 細胞生物学
- バイオテクノロジー
背景:
- ハイブリダイゼーション連鎖反応のようなインシト増幅方法は,分析物の分布をマッピングするのに不可欠です.
- これらの方法の生細胞への応用は,探査器の配送,分解,および細胞毒性の問題により妨げられます.
研究 の 目的:
- 生体細胞内のRNA標的を画像化するための新しい,非侵襲的,遺伝的にコードされたインサイト増幅方法を開発する.
- 生細胞RNA分析の既存の方法の限界を克服する.
主な方法:
- 分割された性RNAレポーター (ブロッコリー) を利用した遺伝的にコード化されたシステム.
- 2つの非光ブロッコリーの断片がRNAヘアピンと結合した.
- 光を活性化するために標的RNA結合によって誘発されたカスケード混合化.
主要な成果:
- さまざまなRNA標的の敏感な検出と細胞下位置イメージングを実証した.
- 生きた細菌と哺乳類の細胞にこの方法を成功裏に応用した.
- 増幅された光信号で細胞内RNAの非侵襲的イメージングを達成した.
結論:
- この新しい設計原理は 細胞内RNAを追跡するための 有効で汎用的なプラットフォームを提供します
- この遺伝子でコード化されたアプローチは 生きている細胞のRNAイメージング能力を高めます
- 以前の方法では,探査器の配送と細胞毒性に関連した主要な課題を克服します.
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