細胞免疫療法のゲノム工学のためのプールのノッキン標的化
Theodore L Roth1, P Jonathan Li2, Franziska Blaeschke2
1Medical Scientist Training Program, University of California, San Francisco, San Francisco, CA, USA; Biomedical Sciences Graduate Program, University of California, San Francisco, San Francisco, CA, USA; Department of Microbiology and Immunology, University of California, San Francisco, San Francisco, CA, USA; Diabetes Center, University of California, San Francisco, San Francisco, CA, USA; Innovative Genomics Institute, University of California, Berkeley, Berkeley, CA, USA.
Cell
|April 18, 2020
まとめ
研究者は,T細胞治療の強化のための遺伝子構造を迅速にテストするために,新しいプーリングノックインスクリーニング技術を開発しました. この方法は,固体腫瘍のクリアランスを改善する新しいキメリック受容体を特定しました.
科学分野:
- 免疫学
- 分子生物学
- 遺伝学
背景:
- 遺伝子組み換え免疫細胞を用いた 細胞移植は 癌の免疫療法の有望なアプローチです
- CRISPRの遺伝子編集は細胞治療を改善しますが,原始細胞機能を改善するための最適な遺伝子構造を特定するには,高通量メソッドが必要です.
研究 の 目的:
- 主要なヒトT細胞におけるノックイン構造をスクリーニングするための高通量技術を開発する.
- 改善されたがん免疫療法のためのT細胞機能を強化する新しい遺伝子改変を特定する.
主な方法:
- 主要なヒトT細胞のノックインスクリーンを集約するために,大きな非ウイルスDNAテンプレートのターゲット統合をバーコード化して追跡する技術を開発した.
- T細胞受容体 (TCR) の集団ノックインスクリーニングを用いて,遺伝子構造の有効性を評価した.
- 単細胞トランスクリプトーム解析と集団スクリーニングを統合したプーリングノックインシーケンス (PoKI-seq) を開発し,細胞の豊富さと状態をex vivoおよびin vivoで測定した.
主要な成果:
- 集団ノックインスクリーニングを通じて,T細胞の適性をインビトロおよびインビボで強化した遺伝子構造を特定した.
- PoKI-seqプラットフォームは,細胞の豊富さと状態をex vivoおよびin vivoで測定することに成功しました.
- 変形成長因子β (TGF-β) R2-41BBキメリック受容体を指名し,固体腫瘍のクリアランスを改善しました.
結論:
- プーリング・ノッキン・スクリーニングは パラレル化された遺伝子配列の再記述のための 強力で適応可能な技術です
- このプラットフォームは 効果的なノッキン遺伝子プログラムの開発を 加速させています
- 特定されたTGF-β R2-41BBキメリック受容体は,固体腫瘍の免疫療法の強化の可能性を示しています.
