CRISPR-dCas9を用いた端末ウリジルトランスファーゼによるサイトダイレクトアクセス
Jerrin Thomas George1, Mohd Azhar, Meghali Aich
1Department of Chemistry, Indian Institute of Science Education and Research (IISER), Pune Dr. Homi Bhabha Road, Pune 411008, India.
Journal of the American Chemical Society
|July 14, 2020
まとめ
研究者らは,合成分子を標的遺伝子に結合するために,バイオオルトゴンカル・クリック・ケミストリーを使用する新しいCRISPR技術であるsgRNA-Click (sgR-CLK) を開発した. この技術革新により 遺伝子機能の研究のための 小分子探査機と診断ツールが 精密に表示できます
科学分野:
- 分子生物学
- 化学生物学
- 遺伝子編集技術
背景:
- CRISPRシステムは単一ガイドRNA (sgRNA) による遺伝子ターゲティングに強力です.
- CRISPRを用いて標的遺伝子に小さな分子を示すことは 技術的に限られています
- 遺伝子の機能を理解するには,局所特有の分子尋問が必要です.
研究 の 目的:
- CRISPRを用いて合成分子を標的遺伝子に表示するための革新的な方法を開発する.
- CRISPR技術による 遺伝子への小さな分子結合の 限界を克服するためです
- 遺伝子機能の研究とツールの開発のための多面的なプラットフォームを作成します.
主な方法:
- バイオオルトゴンカル・クリック化学を用いた sgRNA-Click (sgR-CLK) 技術を開発した.
- sgRNAの化学酵素ラベリングのための再利用された末端ウリジリルトランスファーゼ (TUTase).
- クリック反応によるクロマチンの合成タグのサイト固有の表示のために,アジド改変されたsgRNAを生成.
主要な成果:
- CRISPR-dCas9システムと互換性のある機能性アジド尾の sgRNA が実証されています.
- sgR-CLKを使用してサイト特異的な合成タグ (バイオチン) を表示しました.
- sgR-CLKの標的遺伝子の正確な分子表示の有用性を検証した.
結論:
- sgRNA-Click (sgR-CLK) は,CRISPR技術,バイオオートゴーナル化学,およびTUTaseアプリケーションの進歩である.
- この方法は,小分子プローブと診断ツールのサイト向け表示のための簡素化されたアプローチを提供します.
- この技術は遺伝子機能の解読と 新種の分子調節器の開発のための CRISPR ツールボックスを強化します
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