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アミノ酸配列によって導かれたcDNAプローブの生成:ウラート酸化酵素のクローン化

C C Lee¹, X W Wu, R A Gibbs

¹Institute for Molecular Genetics, Baylor College of Medicine, Houston, TX 77030.

Science (New York, N.Y.)

|March 11, 1988

まとめ

研究者は,部分アミノ酸配列を用いて補完的なDNA (cDNA) をクローンするための新しい方法を開発しました. この技術により,豚の尿酸酸化酵素 (porcine urate oxidase cDNA) を成功裏に分離し,関連するヒトの遺伝子を特定しました.

科学分野:

バイオケミストリーバイオケミストリー
分子生物学は分子生物学である.
遺伝学遺伝学とは

背景:

ウレート酸化酵素 (E.C. 1.7.3.3) は尿酸をアラントインに変換する酵素です.
この酵素は,他のほとんどの哺乳類とは異なり,人間や一部の霊長類には存在しない.

研究の目的:

部分アミノ酸配列を用いて補完的なDNA (cDNA) 探査機を生成するための新しい迅速な方法を開発する.
豚尿酸酸化酵素の全長cDNAを分離するために.
人間における同類のウラート酸化酵素遺伝子の存在を調査する.

主な方法:

豚尿酸酸化酵素のアミノ端末アミノ酸配列を決定しました.
ポリメラーゼ連鎖反応 (PCR) ベースの戦略を混合オリゴヌクレオチドプライマーで採用した.
生成されたcDNAプローブを使用して,全長豚尿酸酸化酵素cDNAをスクリーニングし,分離しました.

主要な成果:

新しく,迅速かつ広く適用可能なcDNAクローニング手順が確立されました.
豚尿酸酸化酵素の全長cDNAクローンを成功裏に分離しました.
ヒトにおけるウラート酸化酵素の同型ゲノム配列の存在を証明した.

結論:

開発されたPCRベースのcDNAクローニング方法は効率的で,一部のアミノ酸配列データのみを必要とします.
この技術は,ヒトのウラート酸化酵素のような特定の酵素が欠けている生物における遺伝子配列の研究を容易にする.
この発見は,潜在的な進化的関係を示唆し,尿酸酸化酵素および関連する遺伝子に関するさらなる研究のためのツールを提供します.

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