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単一のアミノ酸変異によって,PIアンコールタンパク質を統合膜タンパク質に変換する
G L Waneck1, M E Stein, R A Flavell
1Biogen Research Corporation, Cambridge, MA 02142.
Science (New York, N.Y.)
|August 5, 1988
まとめ
Qa-2グリコプロテインにおける単一のアミノ酸の変化は,それをフォスファティディルニノシトール (PI) 結合タンパク質から統合膜タンパク質に変換し,その膜アンカリング特性を変化させます.
科学分野:
- 免疫学 免疫学とは
- 分子生物学は分子生物学である.
- 細胞生物学 細胞生物学
背景:
- Qa-2は,細胞表面のグリコタンパク質で,フォスファティディルニノシトール (PI) を通して細胞膜と結合している.
- 構造的には,一級移植抗原 (H-2K,D,L) と類似しており,それらは統合膜グリコタンパク質である.
- Qa-2のトランスメブランセグメントは,H-2K,D,Lと位置295のアスパート酸によって異なっている.
研究 の 目的:
- Qa-2のトランスメブランセグメントの変化による機能的影響を調査する.
- 特定のアミノ酸の置換がQa-2の膜固定機構を変更できるかどうかを判断する.
- 変異したQa-2の性質を,H-2Dのような統合膜タンパク質と比較する.
主な方法:
- サイト・ディレクテッド・ミュータゲネシスにより,Qa-2遺伝子の単一塩基変化を導入し,アスパルタ酸を位置295でバリンで置き換える.
- 細胞表面のQa-2発現と膜の固定の分析.
- PI特異のフォスフォリファーゼCとパパイン分裂に対する感受性を測定する.
- 変異体Qa-2を発現する細胞における他の内生タンパク質へのPIアンカー結合の評価.
主要な成果:
- 単一のアミノ酸置換 (Asp295Val) によって,PI特異のフォスフォリファースC水解に対する細胞表面Qa-2が無感化されました.
- また,Asp295Val変異は,H-2Dと共有する特性であるパパイン分裂に対する耐性を高めました.
- ミュータントのQa-2を発現する細胞は,Thy-1やJ11Dのような他のタンパク質をPI-アンカーする能力を保持していた.
結論:
- 位置295での単一のアミノ酸変化により,PI-リンクされたグリコタンパク質からQa-2を統合膜タンパク質に変換します.
- この変異は,H-2D移植抗原の膜固定特性を模倣しています.
- この発見は,タンパク質の膜結合を決定する際に特定のアミノ酸が果たす重要な役割を強調している.