陽性トランス作用因子と相互作用する遺伝子配列の細胞融合による識別

科学分野:

• * 分子生物学 * 分子生物学
• * 遺伝子規制について
• * 細胞生物学 細胞生物学

背景:

• * 細胞融合の研究では,細胞特異的な遺伝子発現を制御する規制因子が示唆されています.
• *これらの因子と相互作用するシス作用のDNA配列の特徴づけは困難です.
• * 以前の方法は,新しい規制性DNA配列の識別を制限していました.

研究 の 目的:

• * 細胞型特異的な遺伝子調節を研究するために,トランスフェクション-融合技術を開発し,適用する.
• * 遺伝子調節に関与するシス作用のDNA配列とDNA結合部位を特定する.
• * 細胞融合媒介による遺伝子活性化のメカニズムを特徴づける.

主な方法:

• * 安定した遺伝子転送と一時的なヘテロカリオン形成 (トランスフェクション-融合) を組み合わせた.
• * 静止状態のラットプロラクチンプロモーター領域が,マウスの線維芽細胞に安定的に転送された.
• * 核ランオンアッセイと5'-削除変異分析を使用した.

主要な成果:

• *ネズミの垂体細胞との融合により,転移されたネズミのプロラクチンプロモーターの転写が活性化しました.
• *30塩基対のDNA配列が,この活性化に不可欠であると特定されました.
• * この技術は,転移されたラット成長ホルモンプロモーターまたは内生遺伝子を活性化しませんでした.

結論:

• *トランスフェクション-融合技術により,新しい調節性DNA配列が成功裏に特定されました.
• * この方法は,細胞タイプ特異的な遺伝子発現に関与するシス作用の要素を発見するのに有効です.
• * 下垂体細胞は,プロラクチン遺伝子プロモーターを活性化する特定の因子を持っています.