ヒト粒細胞コロニー刺激因子の分子クローニングとcDNAの発現

科学分野:

• バイオケミストリー バイオケミストリー
• 分子生物学は分子生物学である.
• 血液学 ヘマトロジ

背景:

• 顆粒細胞コロニー刺激因子 (G-CSF) は,血液細胞の産生を調節するために重要なグリコタンパク質です.
• ヒトの口腔状がん細胞系 (CHU-2) は,構成的に大量のG-CSFを産生することが確認されました.

研究 の 目的:

• 浄化されたG-CSF.の部分アミノ酸配列を決定する.
• CHU-2細胞系からG-CSF補完DNA (cDNA) を分離し,特徴づけること.
• 正常細胞とCHU-2細胞のG-CSF遺伝子構造を調査する.

主な方法:

• CHU-2細胞調節媒介からG-CSFを浄化する.
• 浄化されたG-CSFのアミノ酸配列.
• CHU-2メッセンジャーRNAからcDNAライブラリを構築.
• オリゴヌクレオチドがG-CSFのcDNAクローンを分離するために探査しています.
• G-CSF cDNAの核酸配列解析について.
• 猿のCOS細胞におけるG-CSFcDNAの発現.
• ゲノムDNAの南部のハイブリッド化分析.

主要な成果:

• G-CSFの部分アミノ酸配列が決定されました.
• CHU-2細胞系から複数のG-CSFcDNAクローンが分離されました.
• COS細胞で発現したcDNAは,生物学的に活性なG-CSFを産生した.
• 南部のハイブリダイゼーションは,ヒトゲノムに1つのG-CSF遺伝子があることを示した.
• G-CSF遺伝子のアレル内の再編成はCHU-2細胞で観察されました.

結論:

• この研究では,G-CSFのcDNAを成功裏に分離し,特徴づけ,その役割が粒球細胞生成に果たされていることを確認しました.
• この発見は,ヒトにおける単一のG-CSF遺伝子の場所を示唆し,がん細胞における潜在的アレル変異があることを示唆している.