高速度光画像対応のセルソート

科学分野:

• 細胞生物学
• バイオテクノロジー
• ゲノミクス

背景:

• 特定の空間的および形態学的特徴を持つ単一の細胞を分離することは,重要な技術的な障害です.
• 現在の細胞分類方法では,複雑な細胞現象型を捉える解像度が不足しています.

研究 の 目的:

• 精密な単細胞分離のための高速画像可能細胞分類 (ICS) 方法を開発する.
• 先進的な現象分析により 細胞分類と集団遺伝子スクリーニングの能力を拡大する.

主な方法:

• 高速画像対応のセルソートリング (ICS) が確立され,多色の光画像を記録し,1万5千のイベント/秒でセルをソートすることができる.
• 細胞形態,タンパク質の局所化,および細胞サイクル分析の強化のためのミトス段階を定量化するためにICSを使用した.
• ICSとCRISPRを組み合わせたスクリーニングで,迅速な全ゲノムスクリーニングを行う.

主要な成果:

• ICSは,細胞形態とタンパク質の局所化を成功裏に定量化し,細胞サイクル分析の解像度を向上させます.
• 約9時間で全ゲノム画像ベースのスクリーンを完了させました.
• 核因子KB (NF-KB) 経路のレギュレータを特定した.

結論:

• ICSは,細胞分類と集団遺伝子スクリーニングに利用可能な表型空間を大幅に拡大します.
• この技術は複雑な細胞表型を分析し 生物学的発見を加速する強力なツールです