35ヌクレオチドスプライスされたリーダー配列は,すべてのトリパノソームメッセンジャーRNAに共通しています

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• 寄生虫学とは,寄生虫学である.
• バイオケミストリー バイオケミストリー

背景:

• アフリカや南米のトライパノソミアシスを引き起こすものを含むトライパノソマチドの寄生虫は,多様なタンパク質を発現します.
• これらの生物のメッセンジャーRNA (mRNA) は,遺伝子発現のために特定の規制要素を必要とします.

研究 の 目的:

• トライパノソームmRNAの共通の配列要素を特定し,特徴づけること.
• トライパノソームの遺伝子発現における保存された35ヌクレオチドのリーダー配列の機能的意義を調査する.

主な方法:

• ハイブリッドアレストされたインビトロトランスレーションアッセイを用いた.
• 35ヌクレオチドリーダー配列を補完するオリゴヌクレオチドが合成され,テストされました.
• VSG mRNAのダウンストリーム配列を標的とした特定のオリゴヌクレオチドが制御実験に使用されました.

主要な成果:

• 共通する35ヌクレオチドリーダー配列は,変異性表面グリコプロテイン (VSGs),チューブリン,カルモジュリンを含むすべてのテストされたトライパノソームmRNAの5'端で特定されました.
• このリーダー配列を補完するオリゴヌクレオチドは,すべてのトライパノソームmRNAの翻訳をin vitroで特異的に抑制しました.
• これらの抑制性オリゴヌクレオチドは,配列が欠けている他の生物からのmRNA翻訳に影響を与えませんでした.
• リーダーシーケンスの下流の領域をターゲットにしたオリゴヌクレオチドは,選択的にVSG合成をブロックしました.

結論:

• 35ヌクレオチドのリーダー配列は,トライパノソームmRNAの至るところにある特徴であり,その翻訳に不可欠である.
• リーダーシーケンスの補完性オリゴヌクレオチドの高特異性は,細胞膜の透過性を達成できる限り,トライパノソーム感染症に対する治療薬としての潜在力を示唆しています.