培養細胞におけるケラチン繊維の免疫光染色

科学分野:

• バイオケミストリー バイオケミストリー
• 細胞生物学 細胞生物学
• 免疫学 免疫学とは

背景:

• ケラチンは,上皮細胞構造に不可欠な中間線維タンパク質です.
• 以前の研究では,様々なケラチン型が特定されましたが,それらのクロス種のホモロジーと細胞分布については,さらなる調査が必要です.

研究 の 目的:

• ケラチンを含む細胞を特定するために,ヒト層角膜のケラチンに対する抗体を生成し,利用する.
• 異なる細胞タイプと種におけるケラチンの存在と分布を調査する.
• 線維芽細胞の中間繊維がケラチンとホモロジーを共有しているかどうかを判断する.

主な方法:

• 浄化されたヒト層角膜 (stratum corneum keratins) に対する抗体を用いた免疫光染色.
• 人間,ウサギ,マウスの組織部と培養細胞の分析.
• 培養細胞をサイトカラーシンBとコルセミドで処理し,フィラメントの安定性を評価する.

主要な成果:

• 抗体は,ヒト,ウサギ,マウスの皮膚および他の層状の状表 epithelia のケラチノサイトを強く染めた.
• 分離した繊維の密集したサイトプラズマネットワーク,おそらく集積されたトノフィラメントは,染色された細胞に観察されました.
• ケラチンは培養されたメゼンキマ細胞 (3T3,NIL,BHK,ヒト二重体フィブロブラスト) や結合組織では検出されなかった.
• 基礎細胞を含むケラチノサイト分化のすべての段階では,豊富なケラチンの存在を示す明るい染色が示されました.

結論:

• この抗体は,ヒト,ウサギ,ネズミの種間で同類のケラチンを認識します.
• ケラチンは,上皮細胞の細胞質の中に特異的に局所され,明確な繊維状のネットワークを形成します.
• 繊維細胞の中間繊維は,ケラチンと区別され,細胞タイプ特有の中間繊維の組成を強調しています.