耐久性の高い細胞治療をプログラムするための合成ノックイン配列のモジュラー・プールの発見
Franziska Blaeschke1, Yan Yi Chen1, Ryan Apathy1
1Gladstone-UCSF Institute of Genomic Immunology, San Francisco, CA 94158, USA; Department of Medicine, University of California, San Francisco, San Francisco, CA 94143, USA.
Cell
|September 15, 2023
まとめ
新しいスクリーニングプラットフォームであるModPoKIは,T細胞治療を改善するための遺伝子改変の迅速な比較を可能にします. 癌に対するCAR-T細胞機能を強化する転写因子構造 (TFAP4) を特定した.
科学分野:
- 免疫学
- 分子生物学
- バイオエンジニアリング
背景:
- 細胞免疫療法の有効性を制限する.
- 多くの遺伝子改変をスクリーニングする方法を開発することは T細胞の機能を再プログラムするのに不可欠です
- 既存の方法は,合成配列の大きなライブラリを比較するスケーラビリティが欠けている.
研究 の 目的:
- DNAノックイン (KI) ライブラリの高通量スクリーニングのための適応可能なプラットフォームを開発する.
- 慢性的な刺激でT細胞の健康と抗癌機能を高める 遺伝子構造を特定する.
- 細胞プログラムのための 複雑な遺伝子の組み合わせの発見を可能にします
主な方法:
- ブロックコード付きアダプタを使用してモジュール化DNAKIライブラリ構築のためのプラットフォームであるモジュール化プールKIスクリーニング (ModPoKI) を開発しました.
- 100の転写因子 (TF) と129の表面受容体 (SR) を含むModPoKIライブラリを作成した.
- 人間のT細胞受容体 (TCR) とキメリック抗原受容体 (CAR) T細胞に30以上のModPoKIスクリーンを実施した.
主要な成果:
- 転写因子AP4 (TFAP4) の構造を特定し,CAR- T細胞の適性および抗がん活性をインビトロおよびインビボで著しく強化した.
- 約10,000のTF組み合わせのライブラリを生成することによって,ModPoKIのモジュール性を実証しました.
- BATF-TFAP4ポリシストロニック構造の非ウイルスのKIを用いて,BATFとTFAP4が重要な標的遺伝子を共発現させることで,T細胞の適性を向上させました.
結論:
- ModPoKIは 細胞機能をプログラムするための 複雑な遺伝子構造を発見するための 効果的なプラットフォームです
- TFAP4とBATFの共同発現はT細胞の機能を再プログラムし,慢性的な刺激中に体力を高めます.
- このプラットフォームは 改善された細胞免疫療法の開発を加速します


