リバーシブル・リアクティブ・アフィニティ・セレクション・マススペクトロメトリーは,共性ペプチド結合体の識別を可能にします

科学分野:

• 生物化学
• 化学生物学
• プロテオミクス

背景:

• 共同結合ペプチド結合剤は,活動ベースのプローブおよび不可逆的な治療阻害剤として重要である.
• 既存の方法は,これらの結合物質を合成ライブラリから識別するために,迅速で,ラベルフリーで,調整可能な親和性選択を欠いている.

研究 の 目的:

• 共同ペプチド結合剤を特定するための新しい,迅速で,ラベルフリーで,調整可能なプラットフォームを開発する.
• 固有のタンパク質標的に対する共性ペプチド結合剤の濃縮と配列化を可能にします.

主な方法:

• ReAct-ASMS (リバーシブル・アフィニティ・セレクション・マス・スペクトロメトリー) プラットフォームの開発
• リバーシブルなペプチド-タンパク質結合形成のために,二酸化硫化物を含むペプチドの混合を用いる.
• 高解像度質量スペクトロメトリー (MS/MS) を使って,減少後の配列化を行う.

主要な成果:

• HPV16 E6とPin1オンコタンパク質に対する共性ペプチド結合体の成功検出
• E6のCys58とPin1のCys113の効率的で選択的なクロスリンクが実証されている.
• 選択的共性結合物質を特定するプラットフォームの能力を検証した.

結論:

• ReAct-ASMSは,共性ペプチド結合物質の発見のための堅牢なプラットフォームを提供します.
• このプラットフォームは,標的となる阻害物質の特定を可能にすることで,臨床前治療の開発を容易にする.
• このアプローチは,共性治療の発見パイプラインを強化します.