化学プロテオミクスは,状態依存性およびプロテオフォーム選択性カスパース-2阻害剤を特定する

科学分野:

• 生化学と分子生物学
• 化学生物学
• プロテアゼ阻害剤の開発

背景:

• カスパスはアポトーシス,炎症,細胞増殖に関与する重要なタンパク質です.
• 選択的カスパース阻害剤の開発は,ヒトの12カスパースの間で高い同質性があるため,困難です.
• 小さな分子はカスパース活性を調節する遺伝的方法の代替案です.

研究 の 目的:

• 選択的なカスパース-2阻害のためのユニークな標的を特定する.
• カスパース2を標的とする小分子阻害剤を開発する.
• 細胞反応における異なるカスパース-2形態の役割を調査する.

主な方法:

• 単一の反応性システインを特定するために,質量スペクトロメトリーに基づく化学プロテオミクス.
• ゲルベースの活性ベースのタンパク質プロファイリング (ABPP) と化合物のスクリーニングのためのTEVプロテアゼ測定法.
• 細胞リゼートと無傷な細胞における焦点のアナログ合成と化学タンパク質分析.

主要な成果:

• カスパース2の非触媒性システインを 標的として特定した
• カスパース-2ジモゲンを選択的に阻害する共性鉛化合物を開発した.
• 部分的に処理されたp32形式のカスパース-2がDNA損傷反応を誘導することを示した.

結論:

• 保存されていない非触媒的なシステイン残基をターゲットにすることで,プロテオフォーム選択的カスパース阻害が可能になります.
• カスパース-2ジモゲンと加工された形態の分層化のためのツール化合物を開発した.
• DNA損傷反応を媒介するp32形態の証拠を提供した.