ヒト腫瘍死滅因子遺伝子のEscherichia coliにおけるクローン化と発現

科学分野:

• 免疫学 免疫学とは
• 分子生物学は分子生物学である.
• バイオケミストリー バイオケミストリー

背景:

• 腫瘍死滅因子 (TNF) は最初,エンドトキシン投与後にマウス血清で発見されました.
• TNFは,正常な細胞を節約しながら,変形細胞系に向かって選択的な細胞毒性を示します.
• この要因は,体内での腫瘍死滅を誘発することに関与しています.

研究 の 目的:

• TNFの特性を特徴づけるために.
• TNFをコードする遺伝子を識別する.
• 治療評価のために再結合TNFを発現し,浄化する.

主な方法:

• SDS-PAGEとゲル濾過を用いたウサギのTNFの浄化.
• 浄化されたTNFの分子量とアイソ電気点の特徴.
• DNAライブラリスクリーニングによるヒトTNF遺伝子識別とE. coliにおける発現.

主要な成果:

• 精製されたウサギのTNFは,約40,000Da (ゲルフィルタレーション) と17,000Da (SDS-PAGE) の分子量を示した.
• 精製された物質は, in vitro 細胞毒性および in vivo の死滅性活性の両方を示した.
• E. coliで生成された再結合ヒトTNFは,浄化し,腫瘍死滅活性を示した.

結論:

• TNFは,細胞毒性および死滅性効果の重要な媒介者です.
• TNFをコードする遺伝子が特定され,成功裏に発現しています.
• 再結合TNFは,がん治療の治療薬として有望である.