アコースティック・エジェクション・マススペクトロメトリーによる高通量共振変調器スクリーニング
Xiujuan Wen1, Chang Liu2, Kiersten Tovar1
1Merck & Co., Inc., Rahway, New Jersey 07065, United States.
高解像度アコースティック・エジェクション・マススペクトロメトリー (AEMS) は,コヴァラント・モディファイヤーの高速で高通量スクリーニングを可能にします. この革新的なプラットフォームは 難しいタンパク質標的に対する 機能的な共性薬候補を 効率的に特定することで 薬剤発見を加速します
科学分野:
- 分析化学
- 薬物の発見
- 生物化学
背景:
- 以前は薬で治療できなかったタンパク質を 標的とする有望な戦略です
- 従来の質量スペクトロメトリ方法 (例えば,LC-MS,SPE-MS) は,速度およびサンプル準備の制限のために,高通量スクリーニングのボトルネックです.
- 大規模な化合物ライブラリを共性結合物質の検出に より迅速で効率的なプラットフォームが必要である.
研究 の 目的:
- 高解像度アコースティック・エジェクション・マススペクトロメトリー (AEMS) の試作品を導入し,評価する.
- 複雑なサンプルを最小限の準備で分析するためのAEMSの実現可能性を評価する.
- AEMSの性能を,共振変数スクリーニングの従来の質量スペクトロメトリ技術と比較する.
主な方法:
- 高解像度アコースティック・エジェクション・マススペクトロメトリー (AEMS) システムのプロトタイプの開発.
- およそ1万の共性変容体のライブラリを50 kDaの標的タンパク質 (ワーナー症候群ヘリケーズ) に対して1536-well形式でスクリーニング.
- 浄化せずに高塩分バッファでのサンプルを直接分析し,その後,共性タンパク質-リガンド添加物の定量化のための自動データ分析を行う.
主要な成果:
- AEMSシステムは 17時間で約1万の化合物のスクリーニングを完了しました
- このスクリーニングは,0. 8のZ'因数と2. 3%のヒット率で高精度を示した.
- 後に行われた生化学検査で,AEMSはLC-MSと比較して偽陽性/偽陰性率が低いことが確認された.
結論:
- 試作のAEMSプラットフォームは,コヴァラント変容体の頑丈で高通量スクリーニングを可能にします.
- AEMSは,サンプル準備を最小限に抑えながら,既存の方法と比較してスループット (10〜100倍) と図書館の容量を大幅に増加させます.
- この革新的なアプローチは,困難な治療目標のための機能的共性薬候補の特定を加速します.
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