Saccharomyces cerevisiaeからのリボソームタンパク質遺伝子を含むクローンDNA配列の分離

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• イースト遺伝学 イースト遺伝学

背景:

• リボソームタンパク質は,タンパク質合成に不可欠です.
• リボソームタンパク質遺伝子の組織を理解することは,遺伝子調節とゲノム構造を理解するために不可欠です.

研究 の 目的:

• イーストのリボソームタンパク質メッセンジャーRNA (mRNA) を豊かにする.
• イーストのリボソームタンパク質遺伝子を特定しクローンする.
• これらの遺伝子の結合と複製数を調査する.

主な方法:

• 小型ポリソームからポリ (A) +小型のmRNAを分離して濃縮する.
• 細胞フリートランスレーションと二次元ゲル電泳により,濃度を評価する.
• 酵母プラズミドバンクを使用して,遺伝子候補者をスクリーニングするために,微分コロニーのハイブリド化.
• クローン遺伝子の複製数と結合の分析.

主要な成果:

• リボソームタンパク質mRNAの5〜10倍濃縮が達成されました.
• 酵母リボソームタンパク質の遺伝子配列を含む5つの異なるクローンが特定されました.
• これらのクローンからのmRNAは,酵母リボソームタンパク質と共移動するポリペプチドをコードします.
• クローン遺伝子の3つのmRNAレベルは,RNA2ロカスによって調節されます.
• 酵母リボソームタンパク質遺伝子の密接なリンクの証拠は見つかりませんでした.
• 遺伝子複製数解析により,単一複製の遺伝子,二重複製の遺伝子,そして潜在的に重複する配列を持つクローン1個が明らかになった.

結論:

• この研究では,分子クローニング技術を使用して,酵母リボソームタンパク質遺伝子を成功裏に強化し,特定しました.
• 発見は,酵母リボソームタンパク質遺伝子がゲノムに緊密に集約されていないことを示しています.
• 確認されたクローンの1つにおける配列の繰り返しの性質を明らかにするために,さらなる調査が必要である.