マウス変数およびヒト常数領域配列を含むキメア製の免疫グロブリン遺伝子の構築

科学分野:

• 免疫学 免疫学とは
• 分子生物学は分子生物学である.
• バイオテクノロジー バイオテクノロジー

背景:

• モノクローナル抗体は,ヒト腫瘍の診断と治療に特異性を持っています.
• ネズミの抗体は,異種抗体の繰り返し投与による免疫反応により中和される.
• ヒトの常数領域とマウスの変数領域を組み合わせたキメリック免疫グロブリンは,これらの免疫反応を緩和することができます.

研究 の 目的:

• マウスとヒトの遺伝子要素を組み合わせてキメア免疫グロブリン遺伝子を構築する.
• 再結合レトロウイルスDNA構造体内のキメア干渉配列の精密なスプライシングを実証する.
• 様々な細胞系におけるキメイア・マウス・ヒトの免疫グロブリン遺伝子を発現させる方法を確立する.

主な方法:

• 特定の重鎖 (H) 変数多様性結合 (VH-D-JH) とCガンマ1遺伝子を有する複合レトロウイルスDNAの構築.
• さまざまな種の遺伝子を利用して,キメイア構造を作り出す.
• 中間配列の正確な除去を確認するために,遺伝子スプライシングの分析.

主要な成果:

• 複合レトロウイルスDNAがキメア免疫グロブリン遺伝子をコードするDNAを成功裏に構築した.
• チメアの中間配列の精密なスプライシングが確認されました.
• Escherichia coli,酵母,動物細胞におけるキメアマウス-ヒト免疫グロブリン遺伝子を発現させる方法を実証した.
• 隠されたスプライスドナー部位の予期せぬ使用が観察され,リーダー配列のないV領域の形成につながりました.

結論:

• 開発された手順は,ヒトの免疫グロブリン遺伝子のキメアマウス免疫グロブリン遺伝子を効果的に構築します.
• この方法は,これらの遺伝子の発現を様々な細胞システムで促進し,潜在的な治療的応用を可能にします.
• 予期せぬスプライシングイベントは,V領域の遺伝子形成の新たな側面を強調しています.