RNAポリメラーゼIIの転写因子は,アデノウイルスの主要な遅いプロモーターの上流要素と結合する

R W Carthew, L A Chodosh, P A Sharp

Cell

|December 1, 1985

まとめ

新しい転写因子であるMLTFは,アデノウイルスの主要後期プロモーターに特異的に結合する. この結合は遺伝子転写を活性化し,ウイルスの遺伝子調節における重要なメカニズムを明らかにします.

科学分野:

分子生物学は分子生物学である.
ウイルス学ウイルス学ウイルス学
遺伝子規制遺伝子規制

背景:

ウイルスの遺伝子発現の調節を理解することは,ウイルス学において極めて重要です.
特定のタンパク質とDNAの相互作用が,転写の開始を左右する.
アデノウイルスの主要遅発プロモーター (MLaP) は,真核転写のよく研究されたモデルである.

研究の目的:

アデノウイルスの主要後期プロモーターに結合するHeLa細胞抽出物からタンパク質を識別する.
トランスクリプションの調節における特定されたDNA結合タンパク質の機能を特徴づける.
特定のDNA結合因子がMLaP活性に影響を与えるメカニズムを解明する.

主な方法:

タンパク質とDNAの相互作用を検出するために,ゲルエレクトロフォレスによるDNA結合アッセイが使用されました.
DNAase I足跡測定は,特定された因子の正確な結合部位をマッピングするために使用されました.
タンパク質結合の機能的影響を評価するために,インビトロ転写アッセイが行われました.
生物化学的分化 (染色学) を用いて,因子の活性を浄化し確認した.

主要な成果:

主要な遅期のプロモーター転写因子 (MLTF) は,特定のDNA結合タンパク質として特定されました.
MLTFは,MLaPのTATAボックス (-50から -66) の上流の領域に高い親和性で結合する.
この上流地域は,MLaPの活動に不可欠であり,MLTFの結合は,このサイトを保護します.
MLTF結合は,上流領域を含むテンプレートからインビトロ転写を刺激する.
MLTFのDNA結合,フットプリント,およびトランスクリプション刺激活動は,同分化.

結論:

MLTFは,アデノウイルスの主要後期プロモーターの特定の上流要素に直接結合する重要な転写因子です.
この上流領域へのMLTFの結合は,MLaPからの転写を活性化するために重要である.
これらの発見は,ウイルスの遺伝子発現における特定のタンパク質-DNA相互作用によって媒介される転写活性化の直接的なメカニズムを明らかにしています.

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