RBM15は,m⁶A TNFSF9のメチル化を標的とし,腫瘍関連マクロファージをM2フェノタイプに偏化させることで,パクリタキセル耐性を強化する

科学分野:

• 腫瘍学
• 分子生物学
• 免疫学

背景:

• トリプルネガティブ乳がん (TNBC) は,治療の選択肢が限られていると予後が悪い.
• 化学療法に対する薬剤耐性はTNBC治療における大きな課題です.
• 化学抵抗のメカニズムを理解することは 効果的な治療法の開発に不可欠です

研究 の 目的:

• TNBCにおけるパクリタキセル (PTX) 耐性におけるRNA結合モチーフタンパク質15 (RBM15) の役割を調査する.
• RBM15がPTX耐性を与える分子メカニズムを解明する.
• RBM15が腫瘍の微小環境,特にマクロファージの分極化に与える影響を調査する.

主な方法:

• PTX耐性TNBC細胞の上昇調節遺伝子を特定するためのバイオ情報分析.
• PTX耐性TNBC細胞系 (MDA-MB-231/PTX,MDA-MB-468/PTX) の構成と特徴づけについて
• 様々な測定法 (CCK-8,EDU,フローサイトメトリー,トランスウェル) を用いて細胞生存,増殖,アポトーシス,移住,侵入,およびマクロファージの偏極化の評価.
• TNFSF9とRBM15のタンパク質とmRNAのレベルを検出する (ウェスタン・ブロット,RT-qPCR).
• m6A改変試験 (RIP,MeRIP) を用いてRBM15-TNFSF9の相互作用を分析した.
• 異種移植腫瘍モデルを用いた in vivo 検証

主要な成果:

• TNFSF9は,PTX耐性TNBC細胞で高度に発現し,その静止はPTXの感受性を高めました.
• TNFSF9を静止すると,マクロファージの偏分がM2からM1に変化し,サイトカインプロファイル (IL-10,TGF-βの減少,IL-1β,TNF-αの増加) が変化した.
• RBM15はm6A変異によってTNFSF9発現を調節することが判明した.
• TNFSF9の過剰発現は,RBM15静止の腫瘍抑制効果を in vitro および in vivo で逆転させた.
• 患者サンプルでは,PTX耐性TNBC組織における高TNFSF9発現におけるRBM15の役割が確認された.

結論:

• RBM15は,TNFSF9のm6Aメチル化を強化することによって,TNBCにおけるPTX耐性を促進する.
• このプロセスは,腫瘍に関連したマクロファージのM2極化につながり,化学抵抗に寄与する.
• RBM15/TNFSF9軸を標的にすることは,TNBCにおけるPTX耐性を克服するための新しい治療戦略を代表する可能性があります.