Mycoplasma genitaliumに対する新しいSHERLOCK検査の開発と臨床評価

科学分野:

• 微生物学
• 分子診断
• 感染症

背景:

• * Mycoplasma genitalium (MG) は男性における尿路炎と前立腺炎に関連した重要な性感染症である.
• * 現在の核酸増強試験 (NAAT) は診断の黄金基準ですが,専門機器の要求により,診療所 (POCT) のアクセシビリティがありません.
• * POCTの選択肢が限られているため,早期の診断と治療が困難になり,MGの伝播に寄与する可能性があります.

研究 の 目的:

• * Mycoplasma genitaliumの迅速で敏感でアクセシブルな診察診断法を開発し,検証する.
• *MG検出のためにCRISPR-Cas13aと同熱増幅を組み合わせたSHERLOCK (特定高感度酵素レポーター解鎖) プラットフォームを使用する.
• * Mg219遺伝子を標的として,MGの特定と信頼性の高い識別を行う.

主な方法:

• * Mycoplasma genitaliumのMg219遺伝子を標的とした新しいSHERLOCK測定法の開発
• * 臨床用尿サンプルからの原始DNA抽出を最適化して,直接検査に使用する.
• * 日本におけるMG尿路炎の疑いのある男性から採取した128個の尿サンプルを用いたSHERLOCK試験の評価.
• * SHERLOCKの結果とコバスのTV/MG検査と社内定量PCRの比較
• * 60分以内に視覚的な解釈のための横流測定法による結果の検出

主要な成果:

• * 開発されたSHERLOCKアッセイは,他の病原体とのクロスリアクティビティのない10コピーの検出限界を示した.
• * 臨床評価では,cobas TV/ MG PCR テストと全体的に91. 4%が一致し,79. 6%が陽性であり,100%が陰性であった.
• * 検査は60分以内に視覚的に検出され,迅速な処置の可能性を示した.
• * SHERLOCKは,この研究において,定量PCRと比較して優れた性能を示した.

結論:

• * 新しいSHERLOCK検査は,Mycoplasma genitaliumの迅速かつ敏感な検出のための有望なツールです.
• * 原始DNAを使用し,横流経由で視覚的な結果が得られるため,診療所での試験に適しています.
• このSHERLOCKベースのMGの診断方法の臨床的有用性と広範な適用性を確認するために,さらなる見通し研究が必要である.