マスピン/セルピンB5は細胞骨格結合タンパク質で,上皮細胞の形状を調節する

科学分野:

• 細胞生物学
• 分子生物学
• 生物化学

背景:

• マスピン (SerpinB5) は,主に表皮で発現する豊富なタンパク質です.
• マスピンは最初は腫瘍抑制剤として認識され 細胞の結合,移動,侵入を調節する.
• マスピンがこれらの細胞過程を指揮する細胞内メカニズムは,ほとんど不明です.

研究 の 目的:

• 細胞骨動力学と細胞形態学の調節におけるマスピンの細胞内機能を解明する.
• 細胞内のマスピンの直接のタンパク質相互作用パートナーを特定する.

主な方法:

• マスピン相互作用タンパク質を特定するための親和性浄化-質量スペクトロメトリー (AP/MS).
• CRISPR/Cas9による内生マスピンのGFPタグ付けによる局所化研究.
• マスピン枯渇実験のためのRNA干渉 (RNAi) とCRISPR/Cas9.
• In vitro マイクロチューブルポリメリゼーション試験

主要な成果:

• マスピンはマイクロチューブルとマイクロフィラメントの両方と直接相互作用します.
• 内生マスピンは皮質の細胞骨格とミトスフィンドルに局所する.
• マスピン枯渇は細胞と細胞の接触を変化させ,細胞骨格の再編成を引き起こし,ミトーシス中の細胞の形に影響を与えます.
• マスピンは, in vitro と細胞内での微小管の増殖を抑制する.

結論:

• マスピンは細胞皮質とミトスフィンドルで動的役割を果たし,細胞骨格の要素と相互作用する.
• マスピンは細胞の粘着,細胞の形状,細胞骨格の組織を調節する.
• これらの発見は,上皮細胞生物学におけるマスピンの新しい細胞内機能を明らかにしています.