統合失調症における影響を受けたEGFシステムパラダイムを研究するために2つのベタセルリンのCRISPR-Cas9ノックアウトhiPSCラインの生成

科学分野:

• 神経科学
• 遺伝学
• 幹細胞生物学

背景:

• エピデルマ・グロース・ファクター (EGF) 家族は統合失調症に関与しています
• ニューラル幹細胞の増殖と分化に不可欠なEGF関連リガンドであるベタセルリン (BTC) です.
• 統合失調症患者ではBTC濃度の低下が観察されましたが,神経発達におけるBTCの役割は不明です.

研究 の 目的:

• 神経特異化と神経発達におけるベタセルリン (BTC) の役割を調査する.
• 人間の誘発性多能幹細胞 (hiPSC) ラインを生成し,検証する.

主な方法:

• CRISPR/Cas9遺伝子エディティングはBTC-KO hiPSCクローンを作成するために使用されました.
• 遺伝子型決定,配列決定,フロー・アクティベート・セル・ソート (FACS) およびウェスタン・ブロットが検証に使用された.
• In vitro トリリネージの分化可能性が評価された.

主要な成果:

• BTC-KO hiPSCクローンを生成し,検証しました.
• ノックアウトラインにBTCがないことを確認しました.
• BTC-KO hiPSCはトライラインゲージの差異化の可能性を保持していることを実証しました.

結論:

• ベタセルリンのノックアウトによるヒトの多能幹細胞が成功裏に生成され,検証されました.
• これらの細胞は,神経発達におけるベタセルリンの機能と統合失調症との潜在的な関連を研究するためのモデルを提供します.