人工スクリーニングマーカーを用いたL-バリン高産エシェリキア・コライの構築とスクリーニング

科学分野:

• 微生物学
• バイオテクノロジー
• メタボリック・エンジニアリング

背景:

• L-バリンは重要なアミノ酸で,化粧品,医薬品,食品,動物の飼料業界で広く使用されています.
• L-ヴァリンの生産を最適化するには,高収量で費用対効果があり,遺伝的に安定した微生物株の開発が必要です.

研究 の 目的:

• エシェリキア・コリ菌のL-バリン生成株を識別するための効率的なスクリーニング方法の開発.
• 光強度と細胞内L-バリン濃度との相関を確立する.

主な方法:

• 新しいスクリーニングマーカーであるLESGは,Escherichia coli DB-1-1の希少なL-バリンコドン (GTC) を使用して設計されました.
• 大気および室温のプラズマ変異が適用され,その後に高光性変異体を分類するためにフロー細胞測定が行われました.
• 合計240の変異株がスクリーニングされ,143の高光株が分類され,59.5%の分類効率を達成しました.

主要な成果:

• 光が増加した変異株は,野生型と比較してL- ヴァリン発酵タイトルの23. 1%の改善を示した.
• 高収量株のスクリーニング陽性率は62. 5%に達した.
• 24時間以内に達成された最大L- ヴァリンの位数は84. 1g/ Lであった.

結論:

• 開発された光ベースのスクリーニングアプローチは,優れたL-バリン産生細菌株を特定するのに有効です.
• この方法は,L-ヴァリンの工業生産に大きな進歩をもたらします.
• エンジニアリングされたLESGマーカーは,細胞内L-バリン蓄積の信頼できる指標を提供します.